人外周血淋巴細(xì)胞；MC/CAR
產(chǎn)品信息：
來源與背景
由ATCC保藏，源自81歲男性漿細(xì)胞瘤患者外周血。
核心特性：表達(dá)嵌合抗原受體（CAR），用于腫瘤免疫治療研究，但無抗體分泌能力。
生物安全：HIV/HBV/HCV檢測(cè)陰性，支原體檢測(cè)陰性。
產(chǎn)品名稱 | 人外周血淋巴細(xì)胞；MC/CAR | 英文名稱 | MC/CAR：MCCAR |
貨號(hào) | AXB10425 | 生長特性 | 貼壁生長 |
倍增時(shí)間：約24-30小時(shí)（37℃條件下）。
培養(yǎng)操作指南
培養(yǎng)體系與條件
基礎(chǔ)培養(yǎng)基 IMDM（推薦）或RPMI 1640
添加成分 20%胎牛血清（FBS） + 1%青霉素-鏈霉素（P/S） + 1%非必需氨基酸（NEAA）
培養(yǎng)環(huán)境 溫度：37℃ ；
氣相：空氣95% + CO? 5%
傳代比例 1:2至1:5（直接離心傳代）
凍存條件 90%完全培養(yǎng)基 + 10% DMSO，液氮儲(chǔ)存
操作步驟
復(fù)蘇
37℃水浴快速解凍凍存管，加入5 mL完全培養(yǎng)基混勻，離心（1000 RPM，5分鐘）后重懸接種。
關(guān)鍵點(diǎn)：次日換液去除死細(xì)胞，培養(yǎng)瓶需密閉蓋防止污染。
傳代
直接離心（1000 RPM，8-10分鐘）收集細(xì)胞，重懸后按比例分瓶。
注意事項(xiàng)：
避免過度離心（損傷細(xì)胞膜） ；
操作全程需輕柔，防止氣泡機(jī)械損傷。
凍存
匯合度80%時(shí)收集細(xì)胞，離心后用凍存液重懸，程序降溫（-1℃/min）至-80℃后轉(zhuǎn)入液氮。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)
溫度敏感性
嚴(yán)格控溫：高于39℃會(huì)導(dǎo)致不可逆損傷，低于35℃則生長緩慢。
試劑預(yù)熱：培養(yǎng)基、PBS需預(yù)熱至37℃，避免溫度波動(dòng)。
培養(yǎng)細(xì)節(jié)
無血清適應(yīng)：可逐步替換為無血清培養(yǎng)基（如CTS? IMEM），但需梯度馴化。
活率監(jiān)控：臺(tái)盼藍(lán)染色法每日檢測(cè)活率（活率＜90%需優(yōu)化培養(yǎng)條件）。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用
CAR表達(dá)驗(yàn)證：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD3/CD19標(biāo)記（轉(zhuǎn)導(dǎo)后5-6天）。
免疫治療研究：推薦與腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)（效靶比10:1）。
公司正在出售的產(chǎn)品：
NMDAR1 英文名稱： 谷酸受體1抗體 0.1ml | Anti-MKP-2/DUSP4/FITC 熒光素標(biāo)記原活化蛋白激酶0酸酶-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Phospho-NDRG1 (Thr346) 英文名稱： 0酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 0.1ml | CC85C 英文名稱： 卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C抗體 0.2ml |
NPTX1 英文名稱： 神經(jīng)細(xì)胞正五聚體1抗體 0.1ml | Alpha-Fodrin IgG/IgA(Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA)ELISA Kit 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA |
CDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2) 周期素依賴激酶2(抗原) 0.5mg | Anti-Phospho-MK1/2 (Ser217/221) 0酸化原活化蛋白激酶激酶1/2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
6-OHDA(Human 6-hydroxydopamine) ELISA Kit 人6-羥多巴胺 | Anti-CRP/FITC 熒光素標(biāo)記C-反應(yīng)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-phospho-STAT1(pThr701)/FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 5-HTR2B 英文名稱： 5-羥色胺受體2B抗體 0.1ml |
Anti-phospho-IRS1(Ser636/639) 0酸化胰島素受體底物-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子(腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子)(多肽片斷抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg |
Anti-Caspase-6 (CT)/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-GR /FITC 熒光素標(biāo)記糖皮質(zhì)激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Flt-1/VEGFR1 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝 | 人外周血淋巴細(xì)胞；MC/CARAnti-XAF1 XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Phospho-Paxillin(Tyr31) 英文名稱： 0酸化樁蛋白Paxillin抗體 0.1ml | phospho-IKK beta(Ser471) 英文名稱： 0酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 0.1ml |
注意事項(xiàng)與應(yīng)用
無菌操作：必須嚴(yán)格無菌無毒，避免微生物污染和不同細(xì)胞間交叉污染。
營養(yǎng)需求：需提供氨基酸、維生素、無機(jī)鹽、促生長因子等，動(dòng)物細(xì)胞還需血清。
抗生素使用：可添加雙抗或三抗預(yù)防污染，但長期培養(yǎng)不建議持續(xù)使用，以防產(chǎn)生耐藥性。
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)研究的基礎(chǔ)工具，可用于細(xì)胞生理代謝、藥物篩選、疫苗生產(chǎn)等研究。不同細(xì)胞系的具體培養(yǎng)條件需參考相關(guān)文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)經(jīng)驗(yàn)調(diào)整。
關(guān)鍵字： MC/CAR;人外周血淋巴細(xì)胞;貼壁細(xì)胞;
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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