產品信息:

來源與背景
源自奇努克鮭魚(Oncorhynchus tshawytscha)胚胎組織,由ATCC保藏。
產品名稱 | 鮭魚胚胎細胞;CHSE-214 | 英文名稱 | CHSE-214:CHSE214 |
貨號 | AXB10406 | 生長特性 | 貼壁生長 |
用途 | 僅用于科研 實驗 | 種屬 | 魚 |
應用領域:

病毒學研究:對傳染性胰臟壞死病毒(IPNV)、傳染性造血器官壞死病毒(IHN)等魚類病毒高度敏感,是國家標準推薦的檢測細胞系。
環(huán)境毒理學:用于評估水生污染物對魚類細胞的毒性效應。
形態(tài)與生長
形態(tài):成纖維細胞樣,呈長梭形或不規(guī)則多邊形。
生長特性:嚴格貼壁生長,形成單層細胞,增殖速度中等(傳代周期2-3天)。
關鍵優(yōu)勢:在28-37℃范圍內均可生長,但最適溫度為21-25℃(低溫更利于維持分化特性)。
培養(yǎng)操作指南

培養(yǎng)體系與條件
基礎培養(yǎng)基 MEM(EBSS)或M199
添加成分 10%胎牛血清(FBS) + 2mM L-谷氨酰胺 + 1%非必需氨基酸(NEAA)
培養(yǎng)環(huán)境 溫度:21-25℃(推薦)或37℃;氣相:空氣95% + CO? 5%
傳代比例 1:2至1:3(貼壁細胞需胰酶消化)
凍存條件 95%完全培養(yǎng)基 + 5% DMSO,液氮儲存
操作步驟
復蘇
37℃水浴快速解凍凍存管,離心(1000 RPM,5分鐘)去除凍存液,重懸于預熱培養(yǎng)基,轉移至T25培養(yǎng)瓶。
關鍵點:次日換液去除死細胞,連續(xù)觀察2-3天確認貼壁狀態(tài)。
傳代
PBS清洗后,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分鐘(顯微鏡下觀察細胞變圓脫落),加完全培養(yǎng)基終止消化。
注意事項:
消化時間需嚴格控制(過度消化損傷細胞);
懸浮細胞可直接離心傳代(1000 RPM,5分鐘)。
凍存
細胞匯合度80%時消化,離心后用凍存液重懸,程序降溫(-1℃/min)至-80℃后轉入液氮。
關鍵注意事項

污染防控
支原體檢測需定期進行(推薦PCR法),避免交叉污染。
培養(yǎng)細節(jié)
溫度敏感性:37℃培養(yǎng)可能加速細胞老化,建議25℃以下長期維持。
貼壁問題:若細胞脫落,可離心收集后重新接種(1000 RPM,5分鐘)。
實驗應用
病毒接種:細胞匯合度90%時接種病毒,25℃培養(yǎng)可提高病毒滴度。
毒理實驗:暴露污染物前需更換無血清培養(yǎng)基預適應24小時。
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細胞類型與特性

原代細胞:直接從組織中分離的細胞,通常指第1-10代細胞,具有接近體內狀態(tài)的特性。
細胞系:原代細胞首次傳代成功后形成的細胞群,可連續(xù)傳代。
細胞株:從原代培養(yǎng)或細胞系中獲得的具有特殊性質的細胞,通常為第10-50代。
根據(jù)生長方式分為:
貼壁細胞:需附著在培養(yǎng)瓶表面生長,如成纖維細胞、上皮細胞。
懸浮細胞:在培養(yǎng)基中自由懸浮生長,如血液細胞。
半貼壁半懸浮細胞:兼具貼壁和懸浮生長特性。
關鍵字: CHSE-214;鮭魚胚胎細胞;貼壁細胞;
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