商品屬性：

產品核心價值與水產應用

病毒性神經壞死病毒（VNNV）是嚴重危害海水魚類的病原體，可導致幼魚大規(guī)模死亡和成魚神經系統損傷。本試劑盒采用恒溫熒光擴增技術（RAA/LAMP法），突破傳統PCR對儀器的依賴，具有以下核心優(yōu)勢：

現場快速檢測：25分鐘內完成從樣本到結果（傳統PCR需2小時）

便攜式操作：僅需金屬浴或恒溫儀（無需復雜PCR儀）

高靈敏度：檢測限達10拷貝/μL，適用于低病毒載量樣本

養(yǎng)殖場適用：無需專業(yè)實驗室，滿足基層檢測需求

二、技術原理與創(chuàng)新設計

1. 恒溫擴增原理

靶標基因：VNNV RNA2片段編碼的RNA依賴的RNA聚合酶（RdRp）保守區(qū)

技術體系：

重組酶輔助擴增（RAA）：重組酶+單鏈DNA結合蛋白實現常溫核酸擴增

熒光探針：FAM標記的exo探針，實時監(jiān)測擴增信號

防污染設計：反應體系預裝凍干粉，開蓋即用

2. 技術突破

參數  性能指標

反應溫度  39℃恒溫（±2℃耐受）

檢測時間  15-25分鐘（視病毒載量而定）

特異性  不與RGNNV、SJNNV等交叉反應

樣本兼容性  海水魚腦/視網膜組織、魚卵、水體

三、試劑盒組分與儲存

1. 核心組分

凍干擴增微球：含RAA酶、dNTPs、引物探針（單管預裝）

樣本裂解液：快速釋放RNA（免核酸提取）

陽性對照：VNNV RdRp基因RNA片段

陰性對照：無核酸水

熒光校準卡：用于便攜式檢測儀信號校準

2. 儲存與運輸

未開封：4℃保存12個月，-20℃延長至24個月

復溶后：立即使用（不可保存）

運輸條件：常溫（≤25℃）或4℃冷鏈

四、樣本采集與快速處理

1. 最佳樣本類型

樣本類型  采集要求

病魚腦組織  取50mg（避開骨骼）

魚卵  5-10枚勻漿

養(yǎng)殖水體  濾膜濃縮100mL→1mL

2. 關鍵注意事項

采樣時機：幼魚游動異常或螺旋式游泳時立即采樣

防RNA降解：

組織樣本離體后30秒內放入裂解液

避免反復凍融（≤1次）

簡化流程：

無需RNA提取，裂解液直接上樣

渾濁樣本需離心（3000rpm×2min）

五、檢測操作流程

1. 反應體系（25μL）

步驟  操作

裂解樣本  10μL樣本+90μL裂解液，渦旋混勻

加樣  取5μL裂解產物加入凍干微球管

啟動反應  39℃恒溫反應，實時監(jiān)測FAM信號

2. 結果判讀

陽性：熒光信號呈指數上升（閾值時間≤20分鐘）

陰性：無熒光增長或閾值時間>25分鐘

無效：陽性對照無信號（檢查溫度控制）

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