1. 產(chǎn)品介紹

    該產(chǎn)品是基于同源重組原理開發(fā)的一步法單片段無縫克隆試劑盒，屬于非連接酶依賴型體系，載體自連背景極低。高度優(yōu)化的 2×Single CloneMix 預(yù)混了增強型重組酶和重組反應(yīng)所需緩沖液，可顯著提高克隆的重組效率及對雜質(zhì)的耐受程度，因此制備的高純度線性化載體和插入片段可不純化直接用于重組克隆，大大簡化了實驗操作。 

    本試劑盒可以將含有載體末端重疊區(qū)域的插入片段定向重組至任何載體的任何位點，不受酶切位點限制（特殊情況，如有毒基因的克隆或插入外源DNA 后導(dǎo)致質(zhì)粒本身不穩(wěn)定等除外）插入單個片段，載體末端與插入片段末端以及相鄰插入片段末端之間需要15-25bp 能夠相互同源重組的完全一致的序列。插入片段和線性化載體在重組酶作用下，僅需 50℃反應(yīng)5-30min 即可完成重組，重組產(chǎn)物不依賴連接酶直接轉(zhuǎn)化至感受態(tài)細(xì)胞，所獲得的陽性克隆率在95%以上。本產(chǎn)品適用于單個片段的快速無縫克隆、定點突變和高通量克隆等實驗。

2. 產(chǎn)品特點 

1).反應(yīng)快速，節(jié)省時間：可在5-30 min 內(nèi)完成重組。 

2).使用方便，可進行高通量克?。翰皇苊盖形稽c限制，無需對片段酶切。 

3).無縫克?。翰灰腩~外序列。

3. 試劑盒組成

注：a.陽性對照 Control 中包含了 1.6 kb 的線性化載體和 1 kb 的插入片段，Amp 抗性。使用時直接取 10 μL Control 加入 10 μL 2×Single CloneMix，即組成 20 μL 重組反應(yīng)體系。

4. 儲存事項 

-20℃儲存，2-8℃運輸。 

5. 穩(wěn)定性 

本試劑盒在-20℃儲存24 個月不影響使用效果。