小鼠Thioredoxin-1elisa試劑盒
產(chǎn)品簡介:
檢測原理
采用雙抗體夾心法，微孔板預(yù)包被抗硫氧還蛋白-1抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品和樣本后，與生物素標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合，再加入HRP標(biāo)記的鏈霉親和素，催化底物TMB顯色，顏色深淺與硫氧還蛋白-1濃度正相關(guān)。
檢測范圍通常為31.25-1000 pg/mL。
英文名稱 | Mouse Thioredoxin-1 ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Mouse/小鼠Elisa試劑盒 |
貨號 | A129922 | 規(guī)格 | 48T/96T |
試劑盒組成
預(yù)包被抗體的酶標(biāo)板
標(biāo)準(zhǔn)品
生物素標(biāo)記的檢測抗體
HRP標(biāo)記的鏈霉親和素
顯色底物（TMB）
終止液
洗滌液
樣本稀釋液
操作步驟
加入標(biāo)準(zhǔn)品和樣本至微孔板，孵育后洗滌。
加入生物素標(biāo)記的檢測抗體，孵育后洗滌。
加入HRP標(biāo)記的鏈霉親和素，孵育后洗滌。
加入底物溶液，顯色后加入終止液。
酶標(biāo)儀測定吸光度，計算硫氧還蛋白-1濃度。
保存條件
試劑盒應(yīng)儲存在2-8℃，未開封試劑盒的有效期一般為6個月。
注意事項
實(shí)驗(yàn)中需使用一次性吸頭，避免交叉污染。
試劑需按說明書保存，避免凍結(jié)和反復(fù)凍融。
洗滌步驟要徹底，避免殘留液體影響結(jié)果。
顯色時間需控制，避免過度顯色影響讀數(shù)準(zhǔn)確性。
注意事項
嚴(yán)格按照說明書操作，避免交叉污染和非特異性結(jié)合。
樣本避免反復(fù)凍融，未用完的板條密封冷藏（2-8℃）保存。
試劑盒組分不可混用，標(biāo)準(zhǔn)品建議一次性使用。
血漿、血清及組織樣本需規(guī)范處理，避免溶血和雜質(zhì)干擾。
該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn)，是兔MIP-3α/CCL20定量檢測及相關(guān)疾病機(jī)制研究的可靠工具，廣泛應(yīng)用于兔免疫、炎癥、感染等領(lǐng)域的科研。
常見問題解答 (FAQ)
Q1: 為什么要做“復(fù)孔”？
A: 建議每個樣本（包括標(biāo)準(zhǔn)品）都做復(fù)孔（2-3個孔）。這樣可以計算平均值，減少操作誤差，提高數(shù)據(jù)的可信度。
Q2: 樣本需要稀釋嗎？
A: 是的。如果樣本濃度過高，超出了標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測范圍，需要根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)稀釋。計算最終濃度時，記得乘以稀釋倍數(shù)。
Q3: 結(jié)果出現(xiàn)“花板”（背景不均）怎么辦？
A: 可能原因包括：洗板不干凈、溫育溫度不均、加樣時產(chǎn)生氣泡、或者試劑（如底物）受光照分解。請檢查洗板機(jī)是否堵塞，確保溫育箱溫度恒定。
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如何驗(yàn)證試劑盒的特異性？（實(shí)操建議）：
稀釋線性實(shí)驗(yàn) (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進(jìn)行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預(yù)期： 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應(yīng)呈良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實(shí)驗(yàn) (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標(biāo)抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物），檢測其對結(jié)果的影響。
預(yù)期： 若檢測值與理論值偏差在±10%以內(nèi)，說明抗干擾能力強(qiáng)，特異性好。
回收實(shí)驗(yàn) (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)品，檢測總含量，計算回收率。
預(yù)期： 回收率在80%-120%之間，說明試劑盒能準(zhǔn)確識別目標(biāo)，不受樣本背景干擾。
關(guān)鍵字： 小鼠;Thioredoxin-1;ELISA試劑盒;
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