小鼠白細胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品原理
試劑盒采用雙抗體夾心法，基于酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。預(yù)先包被的抗小鼠IL-10抗體與樣本中的IL-10結(jié)合，再加入生物素標記的檢測抗體，形成“固相抗體-IL-10-酶標抗體”復合物。加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的鏈霉親和素，與生物素結(jié)合。加入顯色底物TMB，顏色深淺與IL-10濃度成正比，通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），繪制標準曲線計算樣本濃度。
英文名稱 | Mouse IL-10 ELISA | 產(chǎn)品類別 | Mouse/小鼠Elisa試劑盒 |
貨號 | A105911 | 規(guī)格 | 48T/96T |
主要參數(shù)
靈敏度：通常為9.13-9.38pg/mL。
檢測范圍：15.63-1000pg/mL。
特異性：可特異性檢測小鼠IL-10，與其他類似物無明顯交叉反應(yīng)。
精密度：板內(nèi)變異系數(shù)和板間變異系數(shù)均小于10%。
適用樣本
適用于小鼠血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等生物液體樣本。
操作步驟
標準品稀釋：按說明書進行梯度稀釋。
加樣：設(shè)置空白孔、標準孔和樣本孔，加入相應(yīng)液體。
溫育：封板后37℃溫育，使抗體與抗原充分結(jié)合。
洗滌：多次洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)。
加酶標抗體：加入HRP標記的抗體，避光溫育。
顯色：加入顯色底物，避光顯色。
終止：加入終止液終止反應(yīng)。
測定：酶標儀在450nm波長下測定OD值，計算濃度。
注意事項
樣本處理：避免溶血和反復凍融，確保樣本質(zhì)量。
試劑保存：試劑盒需在2-8℃避光保存，避免污染。
操作規(guī)范：使用一次性槍頭，避免交叉污染；加樣時避免觸及孔壁。
安全防護：操作時佩戴防護設(shè)備，避免接觸有害試劑。
應(yīng)用領(lǐng)域
免疫學研究：研究IL-10在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)中的作用。
病理學研究：探討IL-10在腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移等疾病中的機制
注意事項
嚴格按照說明書操作，避免交叉污染和非特異性結(jié)合。
樣本避免反復凍融，未用完的板條密封冷藏（2-8℃）保存。
試劑盒組分不可混用，標準品建議一次性使用。
血漿、血清及組織樣本需規(guī)范處理，避免溶血和雜質(zhì)干擾。
該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點，是兔MIP-3α/CCL20定量檢測及相關(guān)疾病機制研究的可靠工具，廣泛應(yīng)用于兔免疫、炎癥、感染等領(lǐng)域的科研。
常見問題解答 (FAQ)
Q1: 為什么要做“復孔”？
A: 建議每個樣本（包括標準品）都做復孔（2-3個孔）。這樣可以計算平均值，減少操作誤差，提高數(shù)據(jù)的可信度。
Q2: 樣本需要稀釋嗎？
A: 是的。如果樣本濃度過高，超出了標準曲線的檢測范圍，需要根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果進行適當稀釋。計算最終濃度時，記得乘以稀釋倍數(shù)。
Q3: 結(jié)果出現(xiàn)“花板”（背景不均）怎么辦？
A: 可能原因包括：洗板不干凈、溫育溫度不均、加樣時產(chǎn)生氣泡、或者試劑（如底物）受光照分解。請檢查洗板機是否堵塞，確保溫育箱溫度恒定。
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如何驗證試劑盒的特異性？（實操建議）：
稀釋線性實驗 (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預(yù)期： 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應(yīng)呈良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實驗 (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物），檢測其對結(jié)果的影響。
預(yù)期： 若檢測值與理論值偏差在±10%以內(nèi)，說明抗干擾能力強，特異性好。
回收實驗 (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標準品，檢測總含量，計算回收率。
預(yù)期： 回收率在80%-120%之間，說明試劑盒能準確識別目標，不受樣本背景干擾。
關(guān)鍵字： 小鼠白細胞介素10 ; IL-10;ELISA試劑盒;
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