| 描述 | Ruboxistaurin hydrochloride 是一種選擇性的,ATP-競(jìng)爭(zhēng)性的 PKCβ 抑制劑,對(duì) PKCβI 和 PKCβII 的 IC50 值分別為 4.7 和 5.9 nM,對(duì) PKCη (IC50,52 nM),PKCα (IC50,360 nM),PKCγ (IC50,300 nM) 和 PKCδ (IC50,250 nM) 的抑制作用相對(duì)較弱,而對(duì) PKCζ (IC50,>100 μM) 無(wú)作用。 |
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| 相關(guān)類(lèi)別 | 信號(hào)通路 >> 表觀(guān)遺傳學(xué) >> PKC 信號(hào)通路 >> TGF-beta/Smad 信號(hào)通路 >> PKC 研究領(lǐng)域 >> 代謝疾病 |
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| 靶點(diǎn)實(shí)驗(yàn) | PKCβI:4.7 nM (IC50) PKCβII:5.9 nM (IC50) PKCη:52 nM (IC50) PKCδ:250 nM (IC50) PKCγ:300 nM (IC50) PKCα:360 nM (IC50) PKCε:600 nM (IC50) |
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| 體外研究 | 鹽酸Ruboxistaurin是一種選擇性和ATP競(jìng)爭(zhēng)性PKCβ抑制劑,PKCβI和PKCβII的IC50分別為4.7和5.9 nM,對(duì)PKCη(IC50,52 nM),PKCα(IC50,360 nM),PKCγ(IC50,300)的抑制作用較弱nM),PKCδ(IC50,250 nM),對(duì)PKCζ無(wú)影響(IC50,>100μM)[1]。 Ruboxistaurin(10和400 nM)顯著抑制葡萄糖誘導(dǎo)的單核細(xì)胞粘附至與NG條件下單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的基線(xiàn)粘附無(wú)差異的水平。 Ruboxistaurin(10和400 nM)不會(huì)改變粘附分子的內(nèi)皮表達(dá)或改變內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)[2]。 Ruboxistaurin(LY333531; 10 nM)可降低高糖(HG)誘導(dǎo)的人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞(HRGECs)活力,并抑制與HG孵育的HRGECs中swiprosin-1的增加[3]。 |
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| 體內(nèi)研究 | Ruboxistaurin(LY333531; 1mg/kg/d,持續(xù)8周)顯著降低GEC凋亡以及swiprosin-1上調(diào),并改善糖尿病小鼠的腎小球損傷。 Ruboxistaurin還有效減輕糖尿病小鼠中PARP,cleaved-caspase9,cleaved-caspase3和Bax/Bcl-2比例的表達(dá)[3]。 Ruboxistaurin(LY333531; 0.1,1.0或10.0 mg/kg/d,po.o。)顯著降低了糖尿病大鼠視網(wǎng)膜微循環(huán)中捕獲的白細(xì)胞數(shù)量[4]。 |
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| 細(xì)胞實(shí)驗(yàn) | 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）的第二代在含有明膠的微量滴定板中生長(zhǎng)至匯合。培養(yǎng)基含有5.5mM葡萄糖。如果用27.7mM葡萄糖刺激內(nèi)皮細(xì)胞4天，則將它們以校準(zhǔn)的更高細(xì)胞濃度接種在孔中，以便在進(jìn)行粘附測(cè)定時(shí)獲得相當(dāng)?shù)募?xì)胞密度。因此，在單核細(xì)胞粘附測(cè)定之前，在每個(gè)葡萄糖濃度的對(duì)照孔中徹底測(cè)試孔中的細(xì)胞密度。如果在該測(cè)定中使用Ruboxistaurin，則將其整個(gè)期間加入培養(yǎng)物中[2]。 |
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| 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) | 大鼠[4]在使用和不使用Ruboxistaurin治療的兩組大鼠中，使用每只大鼠的一只眼睛（右眼），在4周糖尿病期后僅評(píng)估白細(xì)胞包埋一次。從鏈脲佐菌素注射到大鼠中時(shí)，以0.1（n = 8），1.0（n = 16）和10.0mg / kg / d（n = 8）的劑量口服施用Ruboxistaurin 4周。在吖啶橙數(shù)字熒光照相術(shù)之前，立即用鹽酸甲苯噻嗪（4mg / kg）和鹽酸氯胺酮（10mg / kg）的混合物（1：1）麻醉大鼠。用0.5％托吡卡胺和2.5％鹽酸苯腎上腺素?cái)U(kuò)張瞳孔。將隱形眼鏡放置在角膜上以在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中保持透明度。每只大鼠將導(dǎo)管插入尾靜脈并放置在可移動(dòng)平臺(tái)上。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，體溫保持在37°C和39°C之間[4]。 |
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| 參考文獻(xiàn) | [1]. Jirousek MR, et al. (S)-13-[(dimethylamino)methyl]-10,11,14,15-tetrahydro-4,9:16, 21-dimetheno-1H, 13H-dibenzo[e,k]pyrrolo[3,4-h][1,4,13]oxadiazacyclohexadecene-1,3(2H)-d ione (LY333531) and related analogues: isozyme selective inhibitors of protein kinase C beta. J Med Chem. 1996 Jul 5;39(14):2664-71. [2]. Kunt T, et al. The beta-specific protein kinase C inhibitor ruboxistaurin (LY333531) suppresses glucose-induced adhesion of human monocytes to endothelial cells in vitro. J Diabetes Sci Technol. 2007 Nov;1(6):929-35. [3]. Wang ZB, et al. LY333531, a PKCβ inhibitor, attenuates glomerular endothelial cell apoptosis in the early stage of mouse diabetic nephropathy via down-regulating swiprosin-1. Acta Pharmacol Sin. 2017 Jul;38(7):1009-1023. [4]. Nonaka A, et al. PKC-beta inhibitor (LY333531) attenuates leukocyte entrapment in retinal microcirculation of diabetic rats. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2000 Aug;41(9):2702-6. |
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