蔓荊子探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 蔓荊子探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Fructus Viticis Probe-based PCR Identification Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR5037 |
預(yù)期用途
本試劑盒基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)（TaqMan探針?lè)ǎ糜诼G子DNA的定性或定量檢測(cè)，適用于科研領(lǐng)域（如物種鑒定、遺傳分析等），不適用于臨床診斷。
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度與特異性：引物和探針針對(duì)蔓荊子高度保守序列設(shè)計(jì)，檢測(cè)限低至100拷貝/反應(yīng)，無(wú)交叉反應(yīng)。
即開(kāi)即用：用戶僅需提供樣品DNA模板，操作簡(jiǎn)便。
雙重檢測(cè)模式：支持定性和定量分析，定量線性范圍達(dá)5個(gè)數(shù)量級(jí)（10^1–10^6拷貝/μL）。
內(nèi)置對(duì)照：提供無(wú)傳染性DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照，避免假陰性干擾。
兼容性：適配主流熒光定量PCR儀（如ABI、Bio-Rad等）。
規(guī)格與組分
| 成分 | 規(guī)格 | 包裝 |
| 2×Probe qPCR MasterMix | 500 μL | 本色蓋離心管 |
| 蔓荊子引物-探針混合液 | 150 μL | 棕色管 |
| 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL | 綠色蓋離心管 |
| 陽(yáng)性對(duì)照（1×10^7拷貝/μL） | 50 μL | 黃色蓋離心管 |
| 使用手冊(cè) | 1份 | — |
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
運(yùn)輸方式：低溫運(yùn)輸（冰袋或干冰）。
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（10倍梯度稀釋）
標(biāo)記離心管（6管），依次稀釋陽(yáng)性對(duì)照至10^1–10^6拷貝/μL，避免交叉污染。
2. 樣品DNA提取
推薦使用商業(yè)化DNA提取試劑盒，設(shè)置陰性/陽(yáng)性制備對(duì)照（N+2樣本）。
3. PCR反應(yīng)體系（20 μL/反應(yīng)）
| 成分 | 樣品管 | 陰性對(duì)照 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線管 |
| 2×MasterMix | 10 μL | 10 μL | 各10 μL |
| 引物-探針混合液 | 3 μL | 3 μL | 各3 μL |
| 待測(cè)DNA模板 | 7 μL | — | — |
| 超純水 | — | 7 μL | — |
| 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | — | — | 各7 μL |
4. PCR擴(kuò)增程序
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 擴(kuò)增 | 95℃ | 15 sec | 45 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min | 45 |
5. 數(shù)據(jù)分析
定量檢測(cè)：以Ct值為縱軸、標(biāo)準(zhǔn)品log濃度為橫軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本濃度。
定性檢測(cè)：陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)為Ct≤35且擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)；Ct≥40為陰性；35<Ct<40需復(fù)測(cè)。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)分區(qū)操作（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），避免氣溶膠污染。
使用帶濾芯槍頭，每步更換槍頭。
反復(fù)凍融不超過(guò)7次，避免試劑降解。
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