靈芝探針法PCR鑒定試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 靈芝探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Ganoderma Probe-based PCR Identification Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5053 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針法熒光定量PCR技術(shù)，專用于靈芝（Ganoderma）的快速、高特異性核酸鑒定。通過優(yōu)化引物和探針設(shè)計，確保僅擴(kuò)增目標(biāo)物種DNA，避免與其他微生物或植物發(fā)生交叉反應(yīng)。適用于科研領(lǐng)域的定性或定量分析，嚴(yán)禁用于臨床診斷。
產(chǎn)品特點
即開即用：用戶僅需提供DNA/RNA模板，試劑預(yù)混緩沖液與酶體系，簡化操作流程。
高特異性與靈敏度：引物及探針針對靈芝保守序列設(shè)計，檢測限低至10<sup>1</sup>拷貝/μL。
內(nèi)置對照系統(tǒng)：含陽性對照（1×10<sup>8</sup>拷貝/μL）和陰性對照，有效區(qū)分假陰性。
兼容性強(qiáng)：與主流核酸提取試劑盒兼容，支持40–50次反應(yīng)（20–40 μL體系）。
雙重檢測模式：支持定性（陰陽性判定）和定量（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）分析，線性范圍達(dá)5個數(shù)量級。
規(guī)格及成分
| 成分 | 規(guī)格/包裝量 | 保存條件 |
| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（紅蓋） | -20℃避光 |
| 靈芝特異性引物混合液 | 100 μL（白蓋） | -20℃避光 |
| 陽性對照（DNA片段） | 50 μL（1×10<sup>8</sup>拷貝/μL） | 單獨(dú)存放，-20℃ |
| 熒光PCR稀釋液 | 1 mL（亮黃色） | -20℃ |
| 核酸釋放劑（試用裝） | 20次（1 mL，綠蓋） | 室溫干燥環(huán)境 |
| 使用手冊 | 1份 | — |
實驗流程
1. 樣本制備
DNA提取：推薦使用兼容性柱式提取試劑盒，設(shè)置N+2個樣本（含陽性/陰性對照）。陽性對照需稀釋至10<sup>3</sup>–10<sup>7</sup>拷貝/μL梯度。
RNA提?。ㄈ暨m用）：需額外進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄步驟（50℃ 30 min）。
2. PCR反應(yīng)體系（20–40 μL）
| 組分 | 樣品管（μL） | 陰性對照（μL） | 陽性對照（μL） |
| PCR緩沖液 | 10 | 10 | 10 |
| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 引物-探針混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 模板DNA/RNA | 5 | — | — |
| 超純水 | — | 5 | — |
| 陽性對照稀釋液 | — | — | 5 |
3. 擴(kuò)增程序
| 步驟 | 溫度 | 時間 |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 5–10 min |
| 循環(huán)擴(kuò)增（35–40次）| 95℃ | 15 sec |
| | 57–60℃ | 15–60 sec（熒光采集） |
| 終延伸 | 72℃ | 10 min |
結(jié)果判讀
定量分析：以Ct值為縱軸，標(biāo)準(zhǔn)品log濃度為橫軸繪制曲線，計算樣本拷貝數(shù)。
定性分析：
陽性：Ct ≤ 35（FAM通道擴(kuò)增曲線顯著）。
可疑：35 < Ct < 40，需復(fù)測。
陰性：Ct ≥ 40或無擴(kuò)增。
注意事項
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、擴(kuò)增需在獨(dú)立區(qū)域進(jìn)行，避免氣溶膠污染。
質(zhì)量控制：每次實驗需包含陰/陽性對照，若對照異常則實驗無效。
保存與運(yùn)輸：-20℃保存，有效期12個月；運(yùn)輸需使用干冰或冰袋（2–8℃）。
安全規(guī)范：實驗廢棄物需按生物危害物處理，工作臺需用10%次氯酸消毒。
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關(guān)鍵字： 靈芝;探針法;PCR鑒定試劑盒;
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