產(chǎn)品用途
科研用途，適用于葶藶子種源性基因的定性或定量檢測。
產(chǎn)品名稱 | 葶藶子探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Semen Lepidii Probe-based PCR Identification Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4961 |
檢測原理
基于實時熒光定量PCR技術(shù)（探針法），通過5'核酸外切酶活性切割探針，釋放報告基團熒光信號。探針5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團，擴增過程中熒光強度與靶序列含量成正比，實現(xiàn)高靈敏、高特異性檢測。
產(chǎn)品組成
| 成分 | 規(guī)格 |
| 探針法qRT-PCR緩沖液 | 500μL |
| 酶混合液 | 100μL |
| 模板稀釋液 | 1mL |
| 引物混合液 | 100μL |
| qRT-PCR探針 | 50μL |
| 陽性對照（1×10?拷貝/μL） | 50μL |
| 說明書 | 1份 |
操作步驟
1. 標準曲線制備
按10倍梯度稀釋陽性對照（102~10?拷貝/μL），獨立操作避免污染。
2. RNA提取
自備樣品RNA，建議設(shè)置陰性/陽性對照。
3. qRT-PCR反應(yīng)
體系配置（20μL/反應(yīng)）：
緩沖液10μL + 酶混合液2μL + 探針1μL + 引物混合液2μL + 模板5μL。
反應(yīng)程序：
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 30分鐘 → 預(yù)變性：94℃ 10分鐘 → 40循環(huán)（94℃ 15秒，60℃ 1分鐘，采集FAM信號）。
數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以標準曲線log值為橫軸，Ct值為縱軸計算樣本濃度。
定性檢測：
陽性：Ct≤35，擴增曲線明顯；陰性：Ct≥40；灰區(qū)（35<Ct<40）需復(fù)測。
注意事項
嚴格分區(qū)操作（樣本處理、試劑配制、擴增），避免交叉污染。
使用帶濾芯槍頭，反應(yīng)液避光保存。
試劑使用前充分離心混勻，避免氣泡。
陽性對照單獨存放，嚴禁用于臨床。
儲存與運輸
儲存：-20℃避光保存。
運輸：泡沫箱加冰密封。
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關(guān)鍵字： 葶藶子;探針法;PCR鑒定試劑盒;
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