韭菜子探針法PCR鑒定試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 韭菜子探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Semen Allii Tuberosi Probe-based PCR Identification Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5069 |
預期用途
用于韭菜子核酸的定性檢測，適用于科研用途，不適用于臨床診斷。
檢驗原理
采用TaqMan探針法實時熒光PCR技術，針對韭菜子基因保守區(qū)域設計特異性引物及探針。探針5'端標記熒光報告基團（如FAM），3'端標記淬滅基團。PCR擴增時，Taq酶切割探針釋放熒光信號，通過實時監(jiān)測熒光強度實現(xiàn)靶序列的定性與定量分析。
試劑組成
擴增體系組分：
預混緩沖液（含dNTPs、Mg2?等）
Taq DNA聚合酶
韭菜子特異性引物及探針混合液
對照品：
陽性質控品（人工合成DNA片段，1×10?拷貝/μL）
陰性質控品（無核酸酶水）
其他：說明書1份。
儲存與運輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融（≤7次），有效期12個月。
運輸條件：低溫避光運輸，建議使用冰袋（2~8℃）。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler等），需配備FAM檢測通道。
樣本要求
樣本類型：植物組織、種子提取物等。
核酸提取：推薦使用柱式DNA提取試劑盒，避免RNA污染。提取后DNA應保存于-20℃（短期）或-70℃（長期）。
操作步驟
試劑配制：
將預混液解凍后渦旋混勻，按N+2（樣本數(shù)+陰陽對照）分裝至PCR管。
每管加入5μL模板DNA（樣本/對照）。
PCR程序：
預變性：95℃ 3min
擴增循環(huán)（40次）：95℃ 15s → 55-60℃ 30s（采集熒光）
數(shù)據(jù)分析：
陽性判定：Ct值≤35，且擴增曲線呈典型S型。
可疑樣本：35<Ct<40，需復測確認。
注意事項
實驗分區(qū)操作（試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)），避免交叉污染。
不同批號試劑不可混用，陰性質控品應無擴增信號（Ct≥40）。
本產(chǎn)品僅限科研使用，嚴禁用于臨床診斷。
質量控制
陽性質控品Ct值需≤30，陰性質控品無擴增。
標準曲線相關系數(shù)（R2）應≥0.98，否則需重新實驗。
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關鍵字： 韭菜子;探針法;PCR鑒定試劑盒;
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