產(chǎn)品概述
本試劑盒采用探針法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，專用于沙苑子（Semen astragali complanati）的核酸定性及定量檢測。通過針對沙苑子基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)的特異性引物和探針，實(shí)現(xiàn)高靈敏度、高特異性的擴(kuò)增，適用于科研用途，不適用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 沙苑子探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Semen Astragali Complanati Probe-based PCR Identification Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4989 |
產(chǎn)品組成
反應(yīng)體系組分
探針法qPCR緩沖液：500 μL
酶混合液：50 μL
熒光PCR模板稀釋液：1 mL
引物-探針干粉：50次反應(yīng)
陽性對照（10^7拷貝/μL）：50 μL
自備材料
無核酸酶離心管、濾芯吸頭（10/200/1000 μL）、熒光定量PCR儀（兼容ABI、Bio-Rad等主流機(jī)型）。
操作流程
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（定量檢測適用）
使用陽性對照進(jìn)行10倍梯度稀釋（10^1–10^6拷貝/μL），每個(gè)稀釋度獨(dú)立操作以避免污染。
2. 樣本DNA提取
推薦采用商品化DNA提取試劑盒，提取后模板保存于-20℃（短期）或-70℃（長期）。
3. PCR反應(yīng)設(shè)置（20 μL體系）
反應(yīng)程序：
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 10分鐘（若需）
預(yù)變性：95℃ 10分鐘
擴(kuò)增循環(huán)（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（采集FAM通道信號）
4. 結(jié)果分析
定量檢測：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本拷貝數(shù)。
定性檢測：
陽性：Ct值≤39；
陰性：Ct值≥40；
灰區(qū)（39<Ct<40）：需復(fù)測確認(rèn)。
注意事項(xiàng)
防污染措施
分設(shè)試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)及擴(kuò)增區(qū)，使用專用耗材及工作服。
實(shí)驗(yàn)后使用10%次氯酸或75%酒精清潔臺(tái)面。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
試劑盒-20℃避光保存，有效期12個(gè)月；運(yùn)輸需使用冰袋（2–8℃）。
局限性
檢測結(jié)果受樣本質(zhì)量、提取方法及操作規(guī)范影響，需結(jié)合其他方法驗(yàn)證。
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關(guān)鍵字： 沙苑子;探針法;PCR鑒定試劑盒;
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