操作要點(diǎn)：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對(duì)小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預(yù)活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學(xué)發(fā)光法，預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述：
MIP-5主要由淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞產(chǎn)生，通過與靶細(xì)胞表面的CCR1受體結(jié)合，介導(dǎo)免疫細(xì)胞向炎癥部位遷移。它在慢性炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化及腫瘤微環(huán)境的形成中扮演重要角色。重組MIP-5蛋白為體外研究該趨化因子的生物學(xué)功能及其信號(hào)通路提供了可靠的實(shí)驗(yàn)材料。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human Macrophage inflammatory5
別名; C-C motif chemokine 15, C-C motif chemokine ligand 15, CC chemokine 3, CCL15, CCL15(29-92), CCL15_HUMAN, Chemokine (C C motif) ligand 15, Chemokine CC-2, Chemokine CC2, HCC-2, HCC2, HMRP 2B, HMRP2B, Leukotactin 1, Leukotactin-1, LKN-1, LKN1, Macrophage inflammatory protein 5, MIP 1D, MIP-1 delta, MIP-1D, MIP-5, MIP1 delta, MIP1d, MIP5, MRP 2B, Mrp-2b, Mrp2b, NCC 3, NCC-3, NCC3, New CC chemokine 3
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 22-113
分子量; 10 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復(fù)溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應(yīng)用建議?:
?實(shí)驗(yàn)用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測(cè)，作為抗原或標(biāo)準(zhǔn)品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求稀釋，避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時(shí)需佩戴手套和護(hù)目鏡，遵循實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范。
重組表達(dá)原理：
基因克隆?：從牛基因組中獲取CST3基因的編碼序列（對(duì)應(yīng)氨基酸31–148），插入含有啟動(dòng)子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達(dá)?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導(dǎo)下啟動(dòng)蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實(shí)現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護(hù)劑，凍干后可長(zhǎng)期穩(wěn)定儲(chǔ)存，復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
睪丸特異性堿性蛋白Y2抗體 | PRDM10k單克隆抗體 |
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（CD71）抗體 | 動(dòng)物細(xì)胞醛酮還原酶1D（aldo-keto reductase 1D）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
微小細(xì)胞血癥相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 | 組織谷草酰轉(zhuǎn)氨酶（GOT）活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒 |
FAM50B蛋白抗體 | 細(xì)胞骨架（肌動(dòng)蛋白微絲；F-ACTIN）綠色熒光染色試劑盒 |
植物氧化型甘肽（GSSG）濃度高效液相色譜定量檢測(cè)試劑盒 | 細(xì)胞TUBULIN蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
腺病毒LacZ穿梭載體 | 體液賴（lysine）含量熒光定量檢測(cè)試劑盒 |
細(xì)胞LCK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C） | 鳥嘌呤解離刺激因子樣蛋白1抗體 |
麥芽粉β-活性DNS比色法定量檢測(cè)試劑盒 | 短鏈脫氫還原酶3抗體 |
組織AMPK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C） | 原鈣粘附蛋白β14抗體 |
高質(zhì)型ECL免疫印跡化學(xué)發(fā)光溶液 | A型禽流感病毒H7N9 M1蛋白抗體 |
PerCP標(biāo)記的血型糖蛋白A（CD235a）抗體 | 利鈉肽受體C抗體 |
冰凍切片線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測(cè)定試劑盒 | Recombinant Human Macrophage inflammatory5癌基因VAV2抗體 |
角蛋白相關(guān)蛋白11-1抗體 | G蛋白偶聯(lián)受體31抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程：
通常包括以下幾個(gè)核心步驟：
基因克?。菏紫龋茖W(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個(gè)被稱為“載體”的DNA分子中，這個(gè)載體就像是一個(gè)運(yùn)輸工具，
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中，這個(gè)過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達(dá)與培養(yǎng)：宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會(huì)讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化：通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法（如層析技術(shù)），將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： Macrophage inflammat;10 kDa; 22-113;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù)，包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺(tái)。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測(cè)、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場(chǎng)所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。