操作要點：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預(yù)活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學(xué)發(fā)光法，預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述：
Recombinant Human MGP（重組人基質(zhì)Gla蛋白）是一種在大腸桿菌中表達(dá)的重組蛋白，作為維生素K依賴性的鈣化抑制劑，能特異性結(jié)合羥基磷灰石和鈣離子，在血管及軟骨礦化調(diào)控研究中具有重要價值。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human MGP
別名; Cell growth inhibiting gene 36 protein, Cell growth-inhibiting gene 36 protein, GAMMA-CARBOXYGLUTAMIC ACID PROTEIN, MATRIX, GIG36, Matrix Gla protein, MGLAP, MGP, MGP_HUMAN, NTI
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 20-96
分子量; 8.4 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復(fù)溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應(yīng)用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標(biāo)準(zhǔn)品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實驗需求稀釋，避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護(hù)目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達(dá)原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對應(yīng)氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達(dá)?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護(hù)劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
睪酮調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因抗體 | PRTFDC1蛋白抗體 |
轉(zhuǎn)錄因子HRT3抗體 | 白三烯E4（LTE4）高效液相色譜法定量檢測試劑盒 |
未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體 | 植物二氧化碳（CO2）濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒 |
FAM76B蛋白抗體 | 細(xì)胞P16蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒 |
石蠟切片磷脂尼羅紅（Nile Red）直接熒光染色試劑盒 | 細(xì)胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒 |
植物葉綠體外膜脂質(zhì)薄層色譜（TLC）分析檢測試劑盒 | 植物賴（lysine）含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒 |
P300組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶（HAT）活性熒光定量檢測試劑盒 | 凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子) |
體液汞元素比色法定量檢測試劑盒 | 癲癇相關(guān)基因6抗體 |
組織基質(zhì)金屬（MMP-2）琥珀酰明膠法比色定量檢測試劑盒 | 乙?；D(zhuǎn)移酶14抗體 |
二氨基苯甲酸（DABA）DNA比色法定量測定試劑盒 | BCL2樣10促凋亡蛋白抗體 |
AF750標(biāo)記的磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 | 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 |
通用型線粒體DNA損傷AP位點比色法定量分析試劑盒 | Recombinant Human MGPβ淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體 |
甲基化樣蛋白4抗體 | HRAS樣抑制因子3抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程：
通常包括以下幾個核心步驟：
基因克?。菏紫?，科學(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中，這個載體就像是一個運輸工具，
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中，這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達(dá)與培養(yǎng)：宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化：通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法（如層析技術(shù)），將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： MGP;8.4 kDa; 20-96;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。