操作要點：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學發(fā)光法，預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述：
Recombinant Human Rap2A（重組人Rap2A蛋白）是一種在大腸桿菌或酵母系統(tǒng)中表達的高純度重組蛋白，作為Ras小GTP酶家族的關(guān)鍵成員，主要用于研究細胞信號轉(zhuǎn)導、細胞骨架重塑及突觸可塑性等生物學過程。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human Rap2A
別名; K REV, KREV, RAP2, RAP2A, RAP2A, member of RAS oncogene family, RAP2A_HUMAN, Ras-related protein Rap-2a, RbBP 30, RbBP-30, RbBP30
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 1-180
分子量; 19.7 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標準品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實驗需求稀釋，避免高濃度導致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對應氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體 | Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1 |
組蛋白賴氨酸N-甲基SETMAR抗體 | 細胞超長鏈脂酰脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑盒 |
微管相關(guān)蛋白9抗體 | 一氧化氮合成酶（NOS）總活性終點比色法定量檢測試劑盒 |
FITC標記人CD23單克隆抗體 | 血清鈣比色法定量檢測試劑盒 |
胞漿甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSH ST）活性酶動力比色法定量檢測試劑盒 | 細胞線粒體復合物I蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒 |
植物細胞葉綠體DNA萃取試劑盒 | 通用型煙草環(huán)斑病毒（Tobacco Ringspot Virus；TRSV） |
細胞三磷酸肌醇（IP3）含量FR定量檢測試劑盒 | 鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白2抗體 |
pPICZ＋目的基因 | 多功能DNA修復酶抗體 |
血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1（ACE1）活性熒光定量檢測試劑盒 | 選擇性剪接因子3B亞基4抗體 |
北方雜交印跡消除試劑盒 | AF700標記人CD33單克隆抗體 |
辣根過氧化物酶標記的白細胞介素13受體a2抗體 | 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 |
胚胎干細胞造血細胞（hematopoitic）定向分化試劑盒 | Recombinant Human Rap2A氨基末端激酶1/2抗體 |
環(huán)指蛋白67抗體 | LIN7C蛋白抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程：
通常包括以下幾個核心步驟：
基因克?。菏紫?，科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中，這個載體就像是一個運輸工具，
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導入選定的宿主細胞中，這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng)：宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化：通過一系列復雜的生物化學方法（如層析技術(shù)），將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： Rap2A;19.7 kDa; 1-180;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術(shù)服務、免疫學和分子學產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應性好、模塊搭配靈活，能快速響應客戶需求的產(chǎn)品。