操作要點(diǎn):

電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對(duì)小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?:采用濕轉(zhuǎn)法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預(yù)活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學(xué)發(fā)光法,預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內(nèi)參,避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述:

Recombinant Human RPL26(重組人核糖體蛋白L26)是一種在大腸桿菌中表達(dá)的高純度重組蛋白,作為核糖體60S大亞基的組成部分,它屬于L24P家族,在蛋白質(zhì)合成及核糖體生物發(fā)生中發(fā)揮基礎(chǔ)作用,同時(shí)被廣泛用作分子量標(biāo)記物(約17 kDa)及癌癥相關(guān)信號(hào)通路(如c-Myc)的研究工具12。
產(chǎn)品名 | Recombinant Human RPL26 | 分子量 | 15.8 kDa |
表達(dá)區(qū)間 | 1-145 | 貨號(hào) | XG-DB3277 |
別名
RPL26L1, 60S ribosomal protein L26, 60S ribosomal protein L26 like 1, DBA11, FLJ46904, L26, OTTHUMP00000135333, PTB associated splicing factor, Ribosomal protein L26, Ribosomal protein L26 homolog, Ribosomal protein L26 like 1, Ribosomal protein L26 pseudogene 1, RL26_HUMAN, rpl26, RPL26P1
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 1-145
分子量; 15.8 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明:

復(fù)溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液(pH 7.4)溶解凍干粉,輕輕混勻至完全溶解。
?應(yīng)用建議?:
?實(shí)驗(yàn)用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測(cè),作為抗原或標(biāo)準(zhǔn)品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求稀釋,避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時(shí)需佩戴手套和護(hù)目鏡,遵循實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范。
重組表達(dá)原理:

基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對(duì)應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動(dòng)子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達(dá)?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動(dòng)蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?:利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實(shí)現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?:加入海藻糖作為保護(hù)劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲(chǔ)存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品:

過量位點(diǎn)蛋白1抗體 | RecQ解旋酶樣蛋白5抗體 |
組蛋白H3樣抗體 | 組織二脂酰甘油(DAG)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法 |
微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體 | 血清/血漿游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
FITC標(biāo)記人CD58單克隆抗體 | (種系)體外卵母細(xì)胞成熟(in vitro maturation;IVM) |
冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)馬森(MASSON) | 載玻片細(xì)胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 |
細(xì)胞KSHV(KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS)病毒定性檢測(cè)試劑盒 | 真菌/酵母細(xì)胞可溶性膜蛋白相位分離制備試劑盒 |
細(xì)胞多巴胺(dopamine)比色法定量檢測(cè)試劑盒 | 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1-Lα抗體 |
體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶CYP2A(COD)活性 | 多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體 |
細(xì)胞基質(zhì)金屬9(MMP9)原位明膠酶譜法(in situ ?zymography)熒光染色試劑盒 | 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體 |
隨機(jī)引物DNA探針同位素標(biāo)記產(chǎn)物完全雙鏈制備試劑盒 | ATP依賴RNA解旋酶DDX39抗體 |
10號(hào)染色體開放閱讀框62抗體 | 磷酸化凋亡相關(guān)蛋白4抗體 |
GMEM培養(yǎng)基 | Recombinant Human RPL26白介素26抗體 |
酵母GAPDH(內(nèi)參)抗體 | LYSMD2蛋白抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個(gè)核心步驟:
基因克?。菏紫龋茖W(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個(gè)被稱為“載體”的DNA分子中,這個(gè)載體就像是一個(gè)運(yùn)輸工具,
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中,這個(gè)過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達(dá)與培養(yǎng):宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會(huì)讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化:通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法(如層析技術(shù)),將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字: RPL26;15.8 kDa; 1-145;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù),包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺(tái)。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測(cè)、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場(chǎng)所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。