技術(shù)原理
本試劑盒采用**實時熒光定量PCR（探針法）**技術(shù)，通過以下步驟實現(xiàn)穿心蓮的特異性鑒定：
探針設(shè)計：探針5'端標(biāo)記熒光報告基團(tuán)（如FAM），3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。當(dāng)探針完整時，熒光信號被淬滅；PCR擴(kuò)增時，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探針，釋放報告基團(tuán)熒光信號。
定量分析：通過檢測熒光信號增長（Ct值）與標(biāo)準(zhǔn)曲線比對，實現(xiàn)模板的定性與定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 穿心蓮探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Herba Andrographitis Probe-based PCR Identification Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR5160 |
產(chǎn)品組成
| 成分 | 規(guī)格 | 功能 |
| 探針法qRT-PCR緩沖液 | 500μL | 提供反應(yīng)體系基礎(chǔ)環(huán)境 |
| 探針法qRT-PCR酶混合液 | 100μL | 含逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶等 |
| 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋及陰性對照 |
| 穿心蓮qRT-PCR引物混合液 | 100μL | 特異性擴(kuò)增靶序列 |
| 穿心蓮qRT-PCR探針 | 50μL | 熒光信號標(biāo)記探針 |
| 陽性對照（1×10?拷貝/μL） | 50μL | 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 |
| 說明書 | 1份 | 操作指南 |
實驗步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
將陽性對照按10倍梯度稀釋（10?~102拷貝/μL），每個梯度獨立操作以避免污染。
2. RNA提取
自備樣品RNA，建議設(shè)置陽性對照（PC）和陰性對照（NC）。
3. qRT-PCR反應(yīng)體系（20μL）
| 組分 | 樣品管 | 陰性對照 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線管 |
| 緩沖液 | 10μL | 10μL | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| 探針 | 1μL | 1μL | 1μL |
| 引物混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| 模板RNA | 5μL | - | - |
| 超純水 | - | 5μL | - |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | - | - | 5μL（對應(yīng)梯度） |
4. 反應(yīng)程序
| 步驟 | 溫度 | 時間 |
| 逆轉(zhuǎn)錄 | 50℃ | 30 min |
| 預(yù)變性 | 94℃ | 10 min |
| 擴(kuò)增（40循環(huán)） | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信號） |
數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計算樣品濃度。
定性檢測：
陽性：Ct≤35，擴(kuò)增曲線呈S型。
陰性：Ct≥40或無擴(kuò)增。
可疑（35<Ct<40）：需復(fù)檢。
注意事項
操作分區(qū)進(jìn)行，避免氣溶膠污染。
探針避光保存，避免反復(fù)凍融。
陽性對照需最后加入，防止交叉污染。
本產(chǎn)品僅限科研使用。
公司正在出售的產(chǎn)品
湖北黃斑樣病毒檢測試劑盒 | 人Toll樣受體9ELISA試劑盒 |
豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人谷氨酸脫氫酶ELISA試劑盒 |
非洲豬瘟(ASFV)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人輔酶Q10ELISA試劑盒 |
豬流行性腹瀉S蛋白（PEDV-S）檢測試劑盒（熒光PCR法） | 人尿酸鹽轉(zhuǎn)運蛋白1ELISA試劑盒 |
豬流行性腹瀉病毒(PEDV)檢測試劑盒(熒光PCR法)（行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)） | 人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒 |
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人補(bǔ)體蛋白9ELISA試劑盒 |
犬瘟熱病毒(CDV)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人膜輔蛋白ELISA試劑盒 |
豬圓環(huán)病毒3型(PCV-3)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人抗Sa抗體ELISA試劑盒 |
甲型流感病毒N6亞型(IAV-N6)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2ELISA試劑盒 |
口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1ELISA試劑盒 |
牛布氏桿菌(BS)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人谷氨酰胺酶ELISA試劑盒 |
穿心蓮探針法PCR鑒定試劑盒羊布氏桿菌(BS)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人Midline人1蛋白ELISA試劑盒 |
牛流行熱病毒(BEFV)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人可溶性淀粉酶前體蛋白αELISA試劑盒 |
異嗜性白血病病毒（X-MuLV）核酸檢測（熒光PCR法） | 人游離蛋白SELISA試劑盒 |
貓支原體（MF）檢測試劑盒（熒光PCR法） | 人轉(zhuǎn)化生長因子β3ELISA試劑盒 |
關(guān)鍵字： 穿心蓮;探針法;PCR鑒定試劑盒;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的產(chǎn)品品牌。
派瑞曼pyram?是一家化學(xué)、生化和材料科學(xué)等領(lǐng)域的科研用研發(fā)產(chǎn)品的制造商和供應(yīng)商,我們的產(chǎn)品在相當(dāng)寬的基礎(chǔ)科學(xué)領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。 客戶包括學(xué)術(shù)界、工業(yè)界和政府的研究和開發(fā)實驗室以及制藥、生物技術(shù)、化工/石化行業(yè)等具商業(yè)規(guī)模的企業(yè)。
派瑞曼pyram?除包括化學(xué)、分析化學(xué)、生命科學(xué)、材料科學(xué)和病理科學(xué)產(chǎn)品。質(zhì)量是所有產(chǎn)品和服務(wù)最關(guān)鍵的組成部分,我們通過質(zhì)量和實力贏得客戶的信賴。產(chǎn)品的質(zhì)量是企業(yè)的生命。
公司秉承"專注品質(zhì)、誠信為本、服務(wù)至上、合作共贏"的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)！