開心果源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 開心果源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 | 英文名稱 | Pistachio-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR5306 |
預(yù)期用途
本試劑盒基于TaqMan探針?lè)晒舛縋CR技術(shù)，用于食品或其他材料中開心果源性成分的定性與定量檢測(cè)。適用于食品安全監(jiān)管、過(guò)敏原篩查及科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷。
檢驗(yàn)原理
探針?lè)ㄔ恚?/span>
探針5'端標(biāo)記熒光報(bào)告基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探針，釋放熒光信號(hào)，信號(hào)強(qiáng)度與靶序列含量成正比。
定量分析：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線（102~10?拷貝/μL）計(jì)算待測(cè)樣本中開心果源性成分的拷貝數(shù)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度：引物及探針針對(duì)開心果保守基因區(qū)域設(shè)計(jì)，檢測(cè)限低至102拷貝/μL。
高特異性：無(wú)與其他植物或病原體的交叉反應(yīng)。
即開即用：預(yù)混緩沖液、酶及引物探針混合物，僅需提供DNA模板。
雙對(duì)照系統(tǒng)：含陽(yáng)性質(zhì)控品（1×10?拷貝/μL）和陰性質(zhì)控品，確保結(jié)果可靠性。
試劑組成
| 成分 | 規(guī)格 |
| qPCR緩沖液 | 500μL |
| 酶混合液 | 100μL |
| 引物混合液 | 100μL |
| TaqMan探針 | 50μL |
| 陽(yáng)性質(zhì)控品 | 50μL（1×10?拷貝/μL） |
| 模板稀釋液 | 1mL |
| 說(shuō)明書 | 1份 |
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
保存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融（≤7次）。
有效期：12個(gè)月。
適用儀器
兼容ABI 7500、Bio-Rad CFX96、LightCycler 480等主流熒光定量PCR儀。
自備耗材
無(wú)核酸酶離心管（0.2mL/1.5mL）、濾芯吸頭（10/200/1000μL）。
核酸提取試劑（推薦柱式提取法）。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（獨(dú)立區(qū)域操作）：
將陽(yáng)性質(zhì)控品10倍梯度稀釋（10?~102拷貝/μL），分裝至標(biāo)記管中。
樣本DNA提取：
使用商品化試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10ng/μL。
PCR反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）：
| 組分 | 體積 |
| qPCR緩沖液 | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL |
| 引物混合液 | 2μL |
| TaqMan探針 | 1μL |
| DNA模板 | 5μL |
擴(kuò)增程序：
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 |
| 逆轉(zhuǎn)錄 | 50℃ | 30 min |
| 預(yù)變性 | 94℃ | 10 min |
| 擴(kuò)增（40循環(huán)） | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信號(hào)） |
結(jié)果分析
定量：以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計(jì)算樣本濃度。
定性：陰性對(duì)照Ct≥40，陽(yáng)性對(duì)照Ct≤35為有效。
注意事項(xiàng)
分區(qū)操作（試劑配制、樣本處理、擴(kuò)增區(qū)），避免污染。
陽(yáng)性質(zhì)控品需最后加入，防止氣溶膠污染。
本產(chǎn)品僅限科研使用。
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