含麩質(zhì)谷物源性探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 含麩質(zhì)谷物源性探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Gluten-containing Grain-derived Probe-based Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5323 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針法熒光定量PCR技術，專用于檢測食品或其他樣本中的麩質(zhì)源性成分。通過特異性引物和探針設計，可實現(xiàn)對麩質(zhì)基因組DNA的高靈敏度、高特異性檢測，適用于科研領域的定性或定量分析。
規(guī)格與成分
試劑一：探針法qRT-PCR緩沖液（500μL）
試劑二：探針法qRT-PCR酶混合液（100μL）
試劑三：熒光PCR專用模板稀釋液（1 mL）
試劑四：含麩質(zhì)谷物源性探針法qRT-PCR引物混合液（100μL）
試劑五：含麩質(zhì)谷物源性qRT-PCR探針（50μL）
試劑六：陽性對照（1×10?拷貝/μL，50μL）
說明書：1份
注：本試劑盒可完成50次20μL體系的反應，僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
儲存條件
運輸：低溫運輸（-20℃）。
保存：-20℃避光保存，有效期12個月。
自備試劑
樣品RNA提取試劑（推薦柱式病毒RNA提取試劑盒）。
超純水（用于陰性對照）。
使用方法
標準曲線制備
使用陽性對照進行10倍梯度稀釋（102~10?拷貝/μL），標記為2~7號管，冰上保存?zhèn)溆谩?/span>
RNA提取
建議設置N+2個樣本（含陽性/陰性對照），采用兼容的RNA提取方法純化樣本。
PCR反應體系（20μL）
按以下比例配制：
| 成分 | 樣品管（μL） | 陰性對照（μL） | 標準曲線管（μL） |
| qRT-PCR緩沖液 | 10 | 10 | 10 |
| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 探針 | 1 | 1 | 1 |
| 引物混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 樣本RNA/標準品/水 | 5 | 5（水） | 5（標準品） |
反應程序
逆轉錄：50℃ 30分鐘
預變性：94℃ 10分鐘
PCR循環(huán)（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集FAM通道信號）。
數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以標準曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計算樣本濃度。
定性檢測：陰性對照Ct值≥40時，樣本Ct值≤35判為陽性。
注意事項
操作需在獨立區(qū)域進行，避免交叉污染。
陽性對照為無傳染性DNA片段，不可直接接觸活體樣本。
若需大規(guī)模檢測，推薦選擇50T/盒規(guī)格，靈敏度可達100拷貝/反應。
產(chǎn)品參數(shù)
最低檢測限：100拷貝/反應
線性范圍：102~10?拷貝/μL
特異性：不與非麩質(zhì)源性DNA發(fā)生交叉反應。
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關鍵字： 含麩質(zhì)谷物源性;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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