鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 鴨源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Duck-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5330 |
檢測原理
基于探針法熒光定量PCR技術(shù)，通過Taq酶的5’核酸外切酶活性切割特異性探針（5’端標(biāo)記熒光報告基團(tuán)，3’端標(biāo)記淬滅基團(tuán)），釋放熒光信號。實(shí)時監(jiān)測擴(kuò)增過程中熒光強(qiáng)度變化，實(shí)現(xiàn)對鴨源性成分的定量及定性分析。
產(chǎn)品組成
| 成分 | 規(guī)格 |
| 探針法qRT-PCR緩沖液 | 500μL |
| 探針法qRT-PCR酶混合液 | 100μL |
| 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL |
| 鴨源性成分引物-探針混合液 | 100μL |
| 鴨源性成分qRT-PCR探針 | 50μL |
| 陽性對照（1×10?拷貝/μL） | 50μL |
| 說明書 | 1份 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度：檢測限低至100拷貝/反應(yīng)。
高特異性：引物探針針對鴨源性成分保守區(qū)設(shè)計，無交叉反應(yīng)。
即開即用：用戶僅需提供樣品RNA模板。
雙重用途：支持定性與定量檢測（線性范圍102~10?拷貝/μL）。
質(zhì)量控制：含陽性對照，可排除假陰性干擾。
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（102~10?拷貝/μL梯度稀釋）
使用陽性對照及專用稀釋液進(jìn)行6個10倍梯度稀釋，冰上保存?zhèn)溆谩?/span>
2. 樣品RNA提取
建議設(shè)置陰性對照（NC）和陽性對照（PC），提取方法需兼容病毒RNA純化。
3. qRT-PCR反應(yīng)體系（20μL）
| 成分 | 體積（μL） |
| qRT-PCR緩沖液 | 10 |
| 酶混合液 | 2 |
| 引物-探針混合液 | 2 |
| 探針 | 1 |
| 樣品RNA/標(biāo)準(zhǔn)品/陰性對照 | 5 |
4. 反應(yīng)程序
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 30分鐘
預(yù)變性：94℃ 10分鐘
PCR循環(huán)（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集FAM通道信號）
數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計算樣品濃度。
定性檢測：陰性對照Ct≥40，陽性對照Ct≤35為有效結(jié)果。
注意事項
操作需在獨(dú)立潔凈區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。
陽性對照為無傳染性DNA片段，不可用于活體實(shí)驗(yàn)。
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 鴨源性成分;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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