產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR技術(shù)，專用于檢測(cè)小反芻獸疫病毒（PPRV）野毒株RNA。適用于科研領(lǐng)域（如病毒溯源、流行病學(xué)調(diào)查），不用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 小反芻獸疫病毒野毒株探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒 | 英文名稱 | Peste des Petits Ruminants Virus Wild Strain Probe-based Real-time RT-PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR5221 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度：優(yōu)化引物與探針，檢測(cè)限低至50拷貝/μL。
強(qiáng)特異性：靶向病毒基因組高度保守區(qū)，避免與其他病原體交叉反應(yīng)。
即開(kāi)即用：用戶僅需提供樣品RNA模板，操作流程標(biāo)準(zhǔn)化。
防污染設(shè)計(jì)：提供無(wú)傳染性DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照，降低實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)。
兼容性：支持常見(jiàn)RNA提取方法（如柱式提取試劑盒）。
規(guī)格與成分
| 成分編號(hào) | 成分名稱 | 規(guī)格 | 包裝顏色 |
| 試劑一 | 探針?lè)╭RT-PCR緩沖液 | 500 μL | 藍(lán)蓋 |
| 試劑二 | 探針?lè)╭RT-PCR酶混合液 | 100 μL | 紅蓋 |
| 試劑三 | 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL | 黃蓋 |
| 試劑四 | PPRV野毒株引物混合液 | 100 μL | 白蓋 |
| 試劑五 | PPRV野毒株qRT-PCR探針 | 50 μL | 棕色管 |
| 試劑六 | 陽(yáng)性對(duì)照（1×10?拷貝/μL） | 50 μL | 黃蓋 |
| - | 使用說(shuō)明書(shū) | 1份 | - |
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
運(yùn)輸方式：低溫運(yùn)輸（干冰或冰袋）。
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（102~10?拷貝/μL梯度）
標(biāo)記離心管（7~2號(hào)），依次用陽(yáng)性對(duì)照進(jìn)行10倍稀釋（每步換槍頭）。
稀釋后冰上保存，避免反復(fù)凍融。
2. 樣品RNA制備
建議設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照（PC）和陰性對(duì)照（NC），提取方法需兼容病毒RNA。
3. qRT-PCR反應(yīng)（20 μL體系）
反應(yīng)體系：
樣品管：10 μL緩沖液 + 2 μL酶混合液 + 1 μL探針 + 2 μL引物 + 5 μL RNA模板。
陰性對(duì)照：以超純水替代模板。
標(biāo)準(zhǔn)曲線管：加入對(duì)應(yīng)梯度稀釋液。
反應(yīng)程序：
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 |
| 逆轉(zhuǎn)錄 | 50℃ | 30 min |
| 預(yù)變性 | 94℃ | 10 min |
| 40循環(huán) | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信號(hào)） |
數(shù)據(jù)分析
定量檢測(cè)：以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計(jì)算樣品濃度。
定性檢測(cè)：陰性對(duì)照Ct值≥40方可判讀，陽(yáng)性樣本需顯著低于閾值。
注意事項(xiàng)
操作需在獨(dú)立潔凈區(qū)域進(jìn)行，避免氣溶膠污染。
陽(yáng)性對(duì)照為高濃度標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋時(shí)需嚴(yán)格分區(qū)操作。
本產(chǎn)品僅限科研使用，檢測(cè)結(jié)果需結(jié)合其他方法驗(yàn)證。
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關(guān)鍵字： 小反芻獸疫病毒野毒株;探針?lè)晒舛?RT-PCR試劑盒;
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