MCE 的所有產(chǎn)品僅用作科學(xué)研究或藥證申報，我們不為任何個人用途提供產(chǎn)品和服務(wù)。

無血清/無蛋白細(xì)胞凍存液

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-K1012

中文名稱：無血清/無蛋白細(xì)胞凍存液

存儲條件：4℃，1年

產(chǎn)品活性：MCE 無血清無蛋白細(xì)胞凍存液是一種非程序性即用型細(xì)胞凍存液。該產(chǎn)品既適用于常規(guī)哺乳動物細(xì)胞的凍存，也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞的凍存。

生物活性：產(chǎn)品既適用于常規(guī)哺乳動物細(xì)胞的凍存，也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞的凍存。本品使用方便，即取即用，凍存過程中無需繁瑣費(fèi)時的程序性降溫步驟，可重懸細(xì)胞后直接進(jìn)行凍存。

描述及優(yōu)勢：

產(chǎn)品既適用于常規(guī)哺乳動物細(xì)胞的凍存，也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞的凍存。本品使用方便，即取即用，凍存過程中無需繁瑣費(fèi)時的程序性降溫步驟，可重懸細(xì)胞后直接進(jìn)行凍存。

操作流程：1. 細(xì)胞凍存 建議凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。 1.1. 細(xì)胞消化：對于貼壁細(xì)胞，采用無菌 PBS 洗滌兩次后添加適量胰酶將其消化成單細(xì)胞懸液；胰酶消化貼壁細(xì)胞后最好讓細(xì)胞在完全培養(yǎng)基中慢慢復(fù)蘇。整個過程要小心操作，避免人為損傷細(xì)胞。懸浮細(xì)胞直接進(jìn)行 1.2 步驟。 注：切記不要過度消化細(xì)胞，以消化至剛好能把細(xì)胞吹打下來為最佳。否則會影響細(xì)胞復(fù)蘇時的存活率。 1.2. 細(xì)胞收集：收集細(xì)胞懸液于離心管中，500 g、4℃ 離心 3-5 min。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。 注：盡可能去除上清，以免在下一步稀釋細(xì)胞凍存液。 1.3. 細(xì)胞重懸：向細(xì)胞沉淀中加入適量 MCE 無血清無蛋白細(xì)胞凍存液，調(diào)整細(xì)胞濃度至 1 × 106-107 cells/mL。輕輕吹勻至單細(xì)胞懸液。整個過程冰上操作，以避免保護(hù)劑對細(xì)胞造成損傷。 1.4. 細(xì)胞分裝：將制備好的細(xì)胞懸液分裝于已標(biāo)記好的細(xì)胞凍存管中，做好密封措施，防止染菌。 1.5. 細(xì)胞凍存：直接將含細(xì)胞懸液的凍存管放入 -80℃ 冰箱中，24 h 后移入液氮長期保存。 2. 細(xì)胞復(fù)蘇 實驗開始前先 37℃ 預(yù)熱細(xì)胞完全培養(yǎng)基。 2.1. 細(xì)胞解凍：取出凍存管，并立即放入 37℃ 水浴鍋中快速解凍。水浴過程中保證凍存管蓋子蓋緊，輕輕搖動管子使其融化完全。 2.2. 細(xì)胞復(fù)蘇：待凍存管細(xì)胞完全融化后，用 75% 酒精棉球擦拭外管，并立即向凍存管中加入少量完全培養(yǎng)基，輕輕吹勻至細(xì)胞懸液；再將細(xì)胞懸液移入已含有 5-10 mL 完全培養(yǎng)基的離心管中，充分混合均勻。 2.3. 細(xì)胞收集：500 g、4℃ 離心 3-5 min。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。 2.4. 細(xì)胞培養(yǎng)：向細(xì)胞沉淀中加入適量新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，充分混合均勻；鏡檢后，根據(jù)實驗需求進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

詳情參考：www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/serum-protein-free-cell-freezing-medium.html