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蛋白 L 磁珠

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-K0205

產品活性：蛋白 L 磁珠使用納米表面生物技術將 Protein L 包被在超順磁性磁珠微球表面。磁珠表面抗體結合位點多，非特異性結合低，使用簡便有效。

描述及優(yōu)勢：

蛋白 L 磁珠術將 Protein L 包被在超順磁性磁珠微球表面，能與具有適當 Kappa 輕鏈的抗體種類和亞型結合，而 Lambda 輕鏈和某些 Kappa 輕鏈則不能結合。在 IP 過程中，所需的磁珠更少，非特異性結合率低，使蛋白 L 磁珠能方便、高效地用于 IP。

操作流程：1. 抗原樣品制備根據不同的樣品選擇合適的處理方法2. 磁珠預處理2.1 充分重懸磁珠.2.2 取 25-50 μL 蛋白質 L 磁珠轉移到 1.5 mL EP 管中（用量量可根據需要調整）。2.3 加入 400 μL 結合/洗滌緩沖液，充分重懸磁珠。將 EP 管放入磁力架上，磁性分離。棄上清液。重復此步驟 2 次。3. 抗體與磁珠結合3.1 使用結合/洗滌緩沖液將抗體稀釋至終濃度為 5-50 μg/mL 。3.2 將稀釋好的 400 μL 抗體加入步驟 2 處理好的磁珠中，充分混懸，置于翻轉混合儀孵育 (室溫，30 mins；4°C，2 hours)。3.3 磁性分離，收集磁珠，上清液收集于新的 EP 管中，以備后續(xù)使用。3.4 加入 400 μL 結合/洗滌緩沖液，充分混懸磁珠，磁性分離，棄上清；重復洗滌 4 次。4. 抗原與抗體-磁珠復合物結合4.1 加入 400 μL 抗原樣品準備的抗原樣品，充分混懸，置于翻轉混合儀孵育 (室溫，30 mins；4°C，2 hours) ，磁性分離，棄上清。4.2 加入 400 μL 結合/洗滌緩沖液 充分重懸磁珠，磁性分離，棄上清；重復洗滌 4 次。5. 抗原洗脫本說明書提供以下兩種抗原洗脫方案，操作者可根據后期檢測的需要選擇不同的抗原洗脫方法。a. 變性洗脫法：此方法洗脫的樣品適用于 SDS-PAGE 檢測。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 25-50 μL 1×SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻，95°C 加熱 5 mins。分離磁珠，收集上清，進行 SDS-PAGE檢測。b. 非變性洗脫法：此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析。步驟：分離磁珠，棄上清，向磁珠中加入 25-50 μL 洗脫緩沖液，室溫孵育 10 mins；分離磁珠，收集上清至新的 EP 管，并立即滴入總體積 1/10 體積的中和緩沖液 (0.1 M NaOH)，將洗脫產物 pH 調節(jié)至中性，樣品用于后期功能分析。注: 本步驟洗脫的抗原為抗原-抗體復合物，如操作者需要單獨洗脫目標抗原，推薦使用交聯(lián)劑，并按相關實驗說明操作。

詳情參考：http://www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/protein-l-magnetic-beads.html