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G418 選擇性抗生素?zé)o菌溶液
品牌：MedChemExpress (MCE)
貨號：HY-K1056
中文名稱：G418 選擇性抗生素?zé)o菌溶液
存儲條件：-20℃；2 年
產(chǎn)品活性：MCE G418 Selective Antibiotic, Sterile 是一種氨基糖苷類抗生素，主要通過影響 80S 核糖體的功能來干擾蛋白質(zhì)的合成，對細(xì)菌、酵母、高等植物、哺乳動物細(xì)胞等均有毒性。
生物活性：MCE G418 選擇性抗生素，滅菌（G418 Selective Antibiotic, sterile）是已過濾除菌，可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)的溶液。G418 選擇性抗生素是一種氨基糖苷類抗生素，主要通過影響 80S 核糖體的功能來干擾蛋白質(zhì)的合成，對細(xì)菌、酵母、高等植物、哺乳動物細(xì)胞等均有毒性。 G418 抗性基因（neo gene）位于轉(zhuǎn)座子 Tn5 或 Tn601 (903)。在 Tn5 上成為氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 3 (II) 或 APH (3) II，而在 Tn601 上則成為氨基糖苷激酶 3 (I) 或APH (3) I。這些基因來源于細(xì)菌，但也可以在真核細(xì)胞中表達(dá)。將任一抗性基因?qū)爰?xì)胞可使細(xì)胞獲得 G-418 抗性，從而用來篩選和維持培養(yǎng)攜帶抗性基因的原核或者真核細(xì)胞。
描述及優(yōu)勢：
MCE G418 選擇性抗生素，滅菌（G418 Selective Antibiotic, sterile）是已過濾除菌，可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)的溶液。G418 選擇性抗生素是一種氨基糖苷類抗生素，主要通過影響 80S 核糖體的功能來干擾蛋白質(zhì)的合成，對細(xì)菌、酵母、高等植物、哺乳動物細(xì)胞等均有毒性。
G418 抗性基因（neo gene）位于轉(zhuǎn)座子 Tn5 或 Tn601 (903)。在 Tn5 上成為氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 3 (II) 或 APH (3) II，而在 Tn601 上則成為氨基糖苷激酶 3 (I) 或APH (3) I。這些基因來源于細(xì)菌，但也可以在真核細(xì)胞中表達(dá)。將任一抗性基因?qū)爰?xì)胞可使細(xì)胞獲得 G-418 抗性，從而用來篩選和維持培養(yǎng)攜帶抗性基因的原核或者真核細(xì)胞。
操作流程：1. G418 選擇性抗生素溶液的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長條件和細(xì)胞代謝率而適當(dāng)調(diào)整。 2. 對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）來確定最佳篩選濃度 1) 以 20-25% 的細(xì)胞密度鋪板，鋪?zhàn)銐蛄康目滓赃M(jìn)行后續(xù)的梯度實驗，37℃ 培養(yǎng)過夜。 2) 準(zhǔn)備含梯度濃度 G418 選擇性抗生素的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基，至少 5 個梯度。以哺乳動物為例，常用濃度為 50-1000 μg/mL，可設(shè)定 0、50、100、200、400、800、1000 μg/mL。 3) 細(xì)胞過夜培養(yǎng)后，使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基，孵育細(xì)胞。每個濃度做 3 個平行對照。 4) 約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。 5) 每日監(jiān)測細(xì)胞，觀察活細(xì)胞比例。通常 7-10 天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的最低濃度為篩選用的工作濃度。
詳情參考：www.medchemexpress.cn/inhibitor-kit/g418-selective-antibiotic-sterile.html