人神經(jīng)內(nèi)分泌分化的結(jié)腸癌細(xì)胞上皮細(xì)胞;LCC18
產(chǎn)品信息：

1. 細(xì)胞基本特性與背景

來源背景： 建立于1991年，取材于一位 67歲男性 患者的結(jié)腸腺癌組織。該腫瘤在病理上表現(xiàn)出神經(jīng)內(nèi)分泌分化（Neuroendocrine Differentiation）的特征。

細(xì)胞類型： 癌細(xì)胞（結(jié)腸腺癌）。

生長特性： 貼壁生長。

細(xì)胞形態(tài)： 上皮細(xì)胞樣（多角形）。

 關(guān)鍵特征：

角蛋白（Keratin）陽性： 證實其上皮來源。

神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記： 可能表達神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）或嗜鉻粒蛋白A（Chromogranin A）等神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物。

遺傳特征： 染色體分析顯示其具有復(fù)雜的核型異常，這是癌細(xì)胞的典型特征。

培養(yǎng)條件與完全培養(yǎng)基配置

LCC18 細(xì)胞的培養(yǎng)條件相對標(biāo)準(zhǔn)，通常使用 RPMI-1640 培養(yǎng)基。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基： RPMI-1640。

添加成分：

胎牛血清 (FBS)： 10%。

雙抗 (Penicillin-Streptomycin)： 1%（通常為青霉素100 U/mL，鏈霉素100 μg/mL）。

可選： 部分實驗室可能會添加非必需氨基酸（NEAA）或丙酮酸鈉，建議參考具體供應(yīng)商說明書。

培養(yǎng)環(huán)境：

溫度： 37℃。

氣相： 5% CO，95% 空氣。

濕度： 飽和濕度。

詳細(xì)培養(yǎng)操作指南

細(xì)胞復(fù)蘇

快速解凍： 將凍存管從液氮中取出，迅速放入 37℃水浴 中，輕輕搖晃，使其在 1 分鐘內(nèi)完全融化。

離心洗滌： 用酒精消毒管壁，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含 4-5 mL 預(yù)熱完全培養(yǎng)基的離心管中混勻。1000 rpm 離心 3-5 分鐘。

重懸接種： 棄去上清，加入適量完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種到 T25 培養(yǎng)瓶中。

靜置觀察： 次日觀察細(xì)胞貼壁情況。建議次日換液以去除殘留的 DMSO。

細(xì)胞傳代（當(dāng)細(xì)胞密度達 80%-90% 時）

棄液洗滌： 棄去舊培養(yǎng)基，用不含鈣鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

消化： 加入 0.25% 胰蛋白酶（Trypsin-EDTA，約 1-2 mL），放入 37℃ 培養(yǎng)箱消化 1-2 分鐘。

注意：LCC18 細(xì)胞貼壁較牢，消化時間可能比普通細(xì)胞稍長，需在顯微鏡下觀察。

終止消化： 待細(xì)胞間隙變大、變圓脫落時，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

離心分瓶： 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管，1000 rpm 離心 5 分鐘。棄上清，加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸，按 1:2 至 1:4 的比例分裝傳代。

細(xì)胞凍存

收集： 按傳代步驟收集處于對數(shù)生長期的細(xì)胞。

凍存液： 推薦使用 90% 完全培養(yǎng)基 + 10% DMSO，或者專用的無血清凍存液。

程序降溫： 將凍存管放入程序降溫盒，置于 -80℃冰箱 過夜，第二天轉(zhuǎn)入 液氮罐 長期保存。

關(guān)鍵注意事項（必讀）

貼壁較弱：

LCC18 細(xì)胞屬于貼壁相對較弱的細(xì)胞。在運輸或換液過程中，可能會看到部分細(xì)胞漂浮。這通常是正常的，離心收集后重新接種即可。

神經(jīng)內(nèi)分泌特性：

在長期培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的神經(jīng)內(nèi)分泌表型可能會發(fā)生漂移。如果需要維持特定的神經(jīng)內(nèi)分泌特征，建議在培養(yǎng)基中添加特定的誘導(dǎo)因子（如某些激素或生長因子），具體需參考相關(guān)文獻。

消化控制：

該細(xì)胞對胰酶比較敏感，消化時間不宜過長，否則容易損傷細(xì)胞膜影響活性。建議在顯微鏡下實時觀察，一旦細(xì)胞間隙變大即刻終止消化。

應(yīng)用場景：

由于其特殊的分化表型，它非常適合用于研究結(jié)直腸癌的神經(jīng)內(nèi)分泌分化機制、激素分泌功能以及靶向治療。

總結(jié)

LCC18 是研究結(jié)直腸癌特殊亞型（神經(jīng)內(nèi)分泌分化）的有力工具。它的核心在于控制消化時間（避免過度消化）和維持特定表型（必要時進行誘導(dǎo)）。只要掌握好這兩點，它就能為你提供穩(wěn)定、可靠的實驗數(shù)據(jù)，助力消化系統(tǒng)腫瘤的研究。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Anti-GLP-2/FITC 熒光素標(biāo)記胰素樣肽-2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	Caspase-3 (CPP32) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(抗原) 0.5mg
Anti-ATX/Autotaxin/E-NPP2/FITC 熒光素標(biāo)記自分泌運動因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh MID2/RNF60/Midline-2 環(huán)指蛋白60抗體 規(guī)格 0.2ml
HGV Polyprotein 英文名稱： 庚型肝炎病毒多聚蛋白抗體 0.1ml	Anti-E Tag E Tag標(biāo)簽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
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Anti-GrB(Granzyme B)(AA 18-29)/FITC 熒光素標(biāo)記顆粒酶B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	TDP-43/TARDBP (tar DNA binding protein) Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Rhesus antibody Rh DRG1 GTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml	人神經(jīng)內(nèi)分泌分化的結(jié)腸癌細(xì)胞上皮細(xì)胞;LCC18CCDCA 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白A抗體 0.2ml
Anti-FANCF/FITC 熒光素標(biāo)記范可尼相關(guān)蛋白F抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	CD20 濃縮液 0.1ml 進口分裝

注意事項與應(yīng)用

無菌操作：必須嚴(yán)格無菌無毒，避免微生物污染和不同細(xì)胞間交叉污染。

營養(yǎng)需求：需提供氨基酸、維生素、無機鹽、促生長因子等，動物細(xì)胞還需血清。

抗生素使用：可添加雙抗或三抗預(yù)防污染，但長期培養(yǎng)不建議持續(xù)使用，以防產(chǎn)生耐藥性。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)研究的基礎(chǔ)工具，可用于細(xì)胞生理代謝、藥物篩選、疫苗生產(chǎn)等研究。不同細(xì)胞系的具體培養(yǎng)條件需參考相關(guān)文獻或?qū)嶒灲?jīng)驗調(diào)整。