人經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤細(xì)胞株;L428
產(chǎn)品信息：

1. 細(xì)胞背景與基本特性

建立時(shí)間與來(lái)源：L-428 細(xì)胞系于 1979 年建立，分離自一位 33 歲女性經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤患者的胸水（胸腔積液）樣本。

細(xì)胞形態(tài)：典型的 HRS 細(xì)胞樣形態(tài)。在顯微鏡下，你通常會(huì)觀察到體積較大的淋巴母細(xì)胞，常表現(xiàn)為雙核或多核仁結(jié)構(gòu)。

免疫表型特征：

CD30 (Ki-1)：陽(yáng)性（強(qiáng)表達(dá)，是經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤的標(biāo)志物）。

CD15 (Lewis X)：陽(yáng)性。

CD45 (LCA)：陰性（白細(xì)胞共同抗原缺失，這也是霍奇金淋巴瘤細(xì)胞的一個(gè)典型特征）。

分子特征：

NF-κB 信號(hào)通路：組成性激活（這是 L-428 細(xì)胞生存的關(guān)鍵機(jī)制）。

JAK/STAT 通路：組成性激活。

EB 病毒：陰性（L-428 細(xì)胞中未檢測(cè)到 EB 病毒基因組）。

生長(zhǎng)特性：主要表現(xiàn)為懸浮生長(zhǎng)，但部分細(xì)胞可能會(huì)表現(xiàn)出輕微的貼壁或聚團(tuán)生長(zhǎng)現(xiàn)象。

核心參數(shù)速覽

種屬來(lái)源  人 (Homo sapiens)

生物安全等級(jí)  BSL-2

倍增時(shí)間  約 24-48 小時(shí)

詳細(xì)培養(yǎng)操作指南

L-428 細(xì)胞屬于淋巴瘤細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)密度和血清質(zhì)量有一定要求。

基礎(chǔ)培養(yǎng)條件

溫度：37℃

氣體環(huán)境：95% 空氣 + 5% CO

濕度：飽和濕度

推薦培養(yǎng)基配方

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：RPMI-1640。

血清：10% - 20% 胎牛血清 (FBS)（建議使用優(yōu)質(zhì)血清，部分實(shí)驗(yàn)室會(huì)提高血清比例以促進(jìn)生長(zhǎng)）。

添加劑：

非必需氨基酸 (NEAA)：1%（推薦添加）。

丙酮酸鈉：1 mM（推薦添加）。

雙抗：1% 青霉素-鏈霉素 (P/S)。

傳代操作

L-428 細(xì)胞通常呈懸浮生長(zhǎng)，因此傳代通常不需要胰酶消化，直接離心分瓶即可。

收集細(xì)胞：將培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中。

離心：1000 rpm (約 200g) 離心 5 分鐘。

棄上清：小心吸去上清液。

重懸：加入新鮮預(yù)熱的完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀。

計(jì)數(shù)與分裝：進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，按 1:3 至 1:5 的比例分裝到新瓶中。

注意：該細(xì)胞有密度依賴性，建議不要稀釋得太厲害，保持適當(dāng)?shù)钠鹗济芏扔兄诩?xì)胞復(fù)蘇和生長(zhǎng)。

凍存與復(fù)蘇

凍存液：推薦使用程序降溫盒，凍存液配方為 90% FBS + 10% DMSO。

復(fù)蘇：37℃ 水浴快速解凍，直接加入含血清的培養(yǎng)基中混勻（無(wú)需離心去除 DMSO，除非細(xì)胞狀態(tài)極差），接種后靜置培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)與常見(jiàn)問(wèn)題

細(xì)胞聚團(tuán)：

L-428 細(xì)胞容易形成細(xì)胞團(tuán)塊。少量聚團(tuán)是正常的，但如果團(tuán)塊過(guò)大，可能會(huì)導(dǎo)致中心細(xì)胞缺氧死亡。

對(duì)策：吹打時(shí)要輕柔地將大團(tuán)塊吹散，但不要過(guò)度用力以免損傷細(xì)胞膜。

輕微貼壁現(xiàn)象：

雖然被定義為懸浮細(xì)胞，但 L-428 有時(shí)會(huì)有輕微的貼壁現(xiàn)象，或者在瓶底看到少量貼壁的基質(zhì)細(xì)胞。

對(duì)策：傳代時(shí)若發(fā)現(xiàn)少量貼壁細(xì)胞，可用槍頭輕輕吹打下來(lái)，通常不需要胰酶消化。

支原體污染：

淋巴瘤細(xì)胞系容易受支原體污染，建議定期檢測(cè)。

標(biāo)志物漂移：

長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)可能導(dǎo)致 CD30 或 CD15 的表達(dá)強(qiáng)度發(fā)生變化。

對(duì)策：建議定期通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)表面標(biāo)志物的表達(dá)情況，以確保細(xì)胞系的穩(wěn)定性。

總結(jié)：L-428 是一款經(jīng)典的懸浮生長(zhǎng)霍奇金淋巴瘤細(xì)胞系。它最大的特點(diǎn)是CD30 和 CD15 陽(yáng)性，且 NF-κB 通路異常激活。培養(yǎng)時(shí)請(qǐng)重點(diǎn)關(guān)注細(xì)胞的聚團(tuán)情況和培養(yǎng)基的 pH 值（RPMI-1640 對(duì)酸堿度較敏感）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Angiotensin II Type 1 Receptor 英文名稱： 緊張素Ⅱ-1型受體抗體 0.1ml	Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6(抗原) 0.5mg
Phospho-Aurora A (Thr288) 英文名稱： 0酸化有絲分裂激酶A抗體 0.1ml	Anti-phospho-IkB beta (Ser23) 0酸化KB抑制蛋白β抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Interferon alpha 6 干擾素α6抗體 規(guī)格 0.2ml	Anti-PDGF-B/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長(zhǎng)因子-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
phospho-ATF2 (Ser490/498) 英文名稱： 0酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml	BetaGAL(Human Alpha-galactosidase) ELISA Kit 人β半乳糖苷酶
Phospho-RIP2 (Ser176) 英文名稱： 0酸化受體結(jié)合絲酸蘇酸激酶2抗體 0.1ml	LNK 英文名稱： 淋巴細(xì)胞特異性接頭蛋白抗體 0.1ml
Anti-CD20/FITC 熒光素標(biāo)記CD20抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	5-HTR3 英文名稱： 5-羥色胺受體3抗體 0.1ml
rhIL-18 英文名稱： 重組人白細(xì)胞介素18抗體 0.1ml	Ach ELISA Kit 大鼠乙酰膽堿
C1ORF151 英文名稱： 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框151抗體 0.1ml	Anti-phospho-c-Raf (Ser338) 0酸化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-arfaptin 1/FITC 熒光素標(biāo)記ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	人經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤細(xì)胞株;L428CT74 英文名稱： /抗原74抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SCUBE1 新型血小板相關(guān)內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體 規(guī)格 0.2ml	CD22 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

注意事項(xiàng)與應(yīng)用

無(wú)菌操作：必須嚴(yán)格無(wú)菌無(wú)毒，避免微生物污染和不同細(xì)胞間交叉污染。

營(yíng)養(yǎng)需求：需提供氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子等，動(dòng)物細(xì)胞還需血清。

抗生素使用：可添加雙抗或三抗預(yù)防污染，但長(zhǎng)期培養(yǎng)不建議持續(xù)使用，以防產(chǎn)生耐藥性。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)研究的基礎(chǔ)工具，可用于細(xì)胞生理代謝、藥物篩選、疫苗生產(chǎn)等研究。不同細(xì)胞系的具體培養(yǎng)條件需參考相關(guān)文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)經(jīng)驗(yàn)調(diào)整。