產(chǎn)品信息：
這是一份關(guān)于人結(jié)直腸癌細(xì)胞（DiFi）的詳細(xì)說(shuō)明、細(xì)胞特性及標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)操作指南。
DiFi 細(xì)胞是一種獨(dú)特的人結(jié)直腸癌細(xì)胞系，它不僅表達(dá)結(jié)直腸癌的標(biāo)志物，還具有表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）的高表達(dá)特征，常用于結(jié)直腸癌的靶向治療及耐藥機(jī)制研究。
細(xì)胞基本信息
種屬來(lái)源：人（Homo sapiens）
組織來(lái)源：結(jié)直腸腺癌（Colorectal Adenocarcinoma）
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
產(chǎn)品名稱 | 人結(jié)直腸癌細(xì)胞;DiFi | 英文名稱 | DiFi：DiFi |
貨號(hào) | AXB10611 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
用途 | 僅用于科研 實(shí)驗(yàn) | 種屬 | 人 |
特殊標(biāo)記：EGFR 高表達(dá)（該細(xì)胞系源于一名對(duì)西妥昔單抗產(chǎn)生耐藥性的患者，EGFR 表達(dá)水平極高）
基因特征：通常攜帶 BRAF V600E 突變（這使得它對(duì) EGFR 抑制劑不敏感，常作為耐藥模型使用）。
培養(yǎng)基：DMEM (高糖) + 10% FBS + 1% 雙抗
細(xì)胞特性與應(yīng)用
特征維度 詳細(xì)描述
背景簡(jiǎn)介 DiFi 細(xì)胞系是從一名患有廣泛轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者的腹水中分離建立的。
EGFR 表達(dá) 該細(xì)胞是研究 EGFR 信號(hào)通路的極佳模型，其 EGFR 表達(dá)水平遠(yuǎn)高于一般的結(jié)直腸癌細(xì)胞系（如 DiFi > A431）。
BRAF 突變 攜帶 BRAF V600E 突變，這意味著它對(duì)西妥昔單抗（Cetuximab）等抗 EGFR 單抗治療通常不敏感，常用于模擬臨床耐藥情況。
主要應(yīng)用 1. 結(jié)直腸癌靶向治療研究（特別是 EGFR 抑制劑）。
耐藥機(jī)制探索。
腫瘤細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。
推薦培養(yǎng)體系
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：DMEM（高糖，High Glucose）
血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)
雙抗添加：1% 青霉素-鏈霉素 (P/S)
培養(yǎng)環(huán)境：
溫度：37℃
氣體環(huán)境：95% 空氣 + 5% CO
濕度：維持培養(yǎng)箱內(nèi)濕度 >90%。
詳細(xì)培養(yǎng)操作指南
1. 細(xì)胞復(fù)蘇 (Thawing)
預(yù)熱：將水浴鍋調(diào)至 37℃，預(yù)熱完全培養(yǎng)基。
解凍：從液氮中取出凍存管，迅速放入 37℃ 水浴中，輕輕搖晃，使其在 1-2 分鐘內(nèi) 快速融化。
轉(zhuǎn)移：用 75% 酒精擦拭凍存管外壁消毒，轉(zhuǎn)入超凈臺(tái)。
稀釋：將細(xì)胞懸液緩慢加入含有 4-6 mL 預(yù)熱完全培養(yǎng)基的離心管中（稀釋 DMSO 毒性）。
離心：1000 rpm (約 250g) 離心 3-5 分鐘。
接種：棄上清，加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸，接種至 T25 培養(yǎng)瓶中，放入培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代 (Passage)
DiFi 為貼壁細(xì)胞。
觀察：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80%-90% 時(shí)進(jìn)行傳代。
清洗：棄去舊培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的 PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞 1 次。
消化：加入適量消化液（0.25% Trypsin-0.53mM EDTA），以覆蓋瓶底為宜。
鏡下觀察：置于 37℃ 培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，在顯微鏡下觀察，待細(xì)胞大部分變圓并脫落時(shí)，迅速拿回操作臺(tái)。
終止：加入含血清的完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打混勻。
離心：1000 rpm 離心 5 分鐘。
重懸與分瓶：棄上清，加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸，按 1:2 至 1:3 的比例進(jìn)行分瓶傳代。
細(xì)胞凍存 (Freezing)
狀態(tài)選擇：選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、活力好、形態(tài)佳的細(xì)胞。
計(jì)數(shù)：消化收集細(xì)胞，離心后重懸，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
凍存液：推薦使用 90% 完全培養(yǎng)基 + 10% DMSO，或?qū)Ｓ脽o(wú)血清凍存液。
密度：調(diào)整細(xì)胞密度至 cells/mL。
程序降溫：分裝入凍存管，使用程序降溫盒（-80℃ 過(guò)夜），然后轉(zhuǎn)入液氮罐長(zhǎng)期保存。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)
BRAF 突變與耐藥性：DiFi 細(xì)胞攜帶 BRAF V600E 突變，這決定了它對(duì)西妥昔單抗等藥物具有天然耐藥性。在進(jìn)行藥物實(shí)驗(yàn)時(shí)，需注意這一背景特征。
EGFR 高表達(dá)：該細(xì)胞是研究 EGFR 通路的絕佳工具，但同時(shí)也意味著其生長(zhǎng)對(duì)血清和生長(zhǎng)因子較為敏感。
運(yùn)輸脫落：DiFi 細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中，可能會(huì)因震蕩導(dǎo)致少量細(xì)胞從瓶壁脫落。收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)瓶底有漂浮細(xì)胞團(tuán)，屬正?，F(xiàn)象。請(qǐng)將瓶?jī)?nèi)液體轉(zhuǎn)移至離心管，離心收集細(xì)胞，棄上清，用 PBS 清洗一次，再用完全培養(yǎng)基重懸后接種回培養(yǎng)瓶中。
支原體檢測(cè)：建議定期檢測(cè)支原體，確保細(xì)胞無(wú)污染。
STR 鑒定：為確保細(xì)胞系的身份純正，防止交叉污染，建議定期進(jìn)行 STR 鑒定。
公司正在出售的產(chǎn)品：
APC70 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體 0.2ml | Catenin,beta 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝 |
Rhesus antibody Rh VEGF 內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-V.cholera Ogawa 01群小川型霍亂弧菌抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Involucrin 囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Leptin receptor 瘦素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
CIRBP 英文名稱： 冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白抗體 0.2ml | BetaGD(Human Beta-glucuronidase) ELISA Kit 人β葡萄糖醛酸苷酶 |
GABR B3 英文名稱： G基受體3抗體 0.2ml | Lpin1 protein 英文名稱： Lpin1 抗體 0.2ml |
Anti-MAG-a/L-MAG 髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | 5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原 0.5mg |
HPV16 E6 protein 英文名稱： 人類狀瘤病毒16抗體 0.1ml | ACH(Mouse acetylcholine) ELISA Kit 小鼠乙酰膽堿 |
Caspase-7 英文名稱： 半胱胺酸蛋白酶蛋白-7抗體 0.1ml | Anti-Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) 0酸化酪氨酸激酶A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 人結(jié)直腸癌細(xì)胞;DiFiAmphetamine(2A3F) 英文名稱： 單克隆/抗體 0.1ml |
c-Myc tag 英文名稱： c-Myc tag標(biāo)簽抗體 0.1ml | CD244 Kit Human 人 2B4 / CD244 ELISA配對(duì)抗體 ELISA |
細(xì)胞類型與特性原代細(xì)胞：直接從組織中分離的細(xì)胞，通常指第1-10代細(xì)胞，具有接近體內(nèi)狀態(tài)的特性。
細(xì)胞系：原代細(xì)胞首次傳代成功后形成的細(xì)胞群，可連續(xù)傳代。
細(xì)胞株：從原代培養(yǎng)或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞，通常為第10-50代。
根據(jù)生長(zhǎng)方式分為：
貼壁細(xì)胞：需附著在培養(yǎng)瓶表面生長(zhǎng)，如成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞。
懸浮細(xì)胞：在培養(yǎng)基中自由懸浮生長(zhǎng)，如血液細(xì)胞。
半貼壁半懸浮細(xì)胞：兼具貼壁和懸浮生長(zhǎng)特性。
關(guān)鍵字： DiFi;人結(jié)直腸癌細(xì)胞;貼壁細(xì)胞;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)是一家化學(xué)、生化和材料科學(xué)等領(lǐng)域的科研用研發(fā)產(chǎn)品的制造商和供應(yīng)商， 我們的產(chǎn)品在相當(dāng)寬的基礎(chǔ)科學(xué)領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用?？蛻舭▽W(xué)術(shù)界、工業(yè)界和政府的研究和開發(fā)實(shí)驗(yàn)室以及制藥，生物技術(shù)，化工/石化行業(yè)等具商業(yè)規(guī)模的企業(yè)。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)除包括化學(xué)、分析化學(xué)、生命科學(xué)和材料科學(xué)阿凡提(affandi)產(chǎn)品線外。 質(zhì)量是所有產(chǎn)品和服務(wù)最關(guān)鍵的組成部分，我們通過(guò)質(zhì)量和實(shí)力贏得客戶的信賴。產(chǎn)品的質(zhì)量是企業(yè)的生命。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)是一個(gè)值得信賴的，以服務(wù)為導(dǎo)向的公司。產(chǎn)品質(zhì)量是我們的立身之本， 但提供給客戶的遠(yuǎn)不止產(chǎn)品本身，現(xiàn)貨庫(kù)存、包裝、應(yīng)急反應(yīng)、客戶的技術(shù)支持等等因素能滿足和超越您的期望對(duì)我們是同樣重要的。我們建立的質(zhì)量管理流程保證 了高水準(zhǔn)的服務(wù)和不斷追求完美的承諾。對(duì)于大多數(shù)目錄產(chǎn)品庫(kù)存，可保證當(dāng)天或第一時(shí)間發(fā)貨，我們也逐漸建立一支業(yè)務(wù)精煉、服務(wù)周到的客服隊(duì)伍，把滿足客戶的 需求作為自己的工作宗旨，運(yùn)用各種方式來(lái)滿足客戶的需求，服務(wù)滲透到售前、售中、售后，甚至延伸產(chǎn)品本身之外，我們爭(zhēng)取做到出售的不再是簡(jiǎn)單的產(chǎn)品，而是服務(wù)。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒； 另有針對(duì)各種動(dòng)物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。