產(chǎn)品信息：

1. 細(xì)胞基本特性與背景

來源背景： 取材于人膽管癌（Cholangiocarcinoma）組織。

細(xì)胞類型： 腫瘤細(xì)胞（膽管癌細(xì)胞）。

生長特性： 貼壁生長。

細(xì)胞形態(tài)： 上皮細(xì)胞樣。

應(yīng)用領(lǐng)域： 僅限于科學(xué)研究，常用于膽管癌的體外藥效評(píng)價(jià)、基因功能研究及腫瘤微環(huán)境構(gòu)建。

培養(yǎng)條件與完全培養(yǎng)基配置

TFK-1 細(xì)胞的培養(yǎng)基配置在不同實(shí)驗(yàn)室或供應(yīng)商之間存在差異，主要集中在使用 DMEM 還是 RPMI-1640。請(qǐng)務(wù)必優(yōu)先參考你所購買細(xì)胞隨附的說明書。以下是兩種常見的配置方案：

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：

方案一（常用）： DMEM（高糖）。

方案二： RPMI-1640。

添加成分：

胎牛血清 (FBS)： 10%。

雙抗 (Penicillin-Streptomycin)： 1%。

培養(yǎng)環(huán)境：

溫度： 37℃。

氣相： 5% CO，95% 空氣。

濕度： 飽和濕度。

詳細(xì)培養(yǎng)操作指南

細(xì)胞復(fù)蘇

快速解凍： 將凍存管從液氮中取出，迅速放入 37℃水浴 中，輕輕搖晃，使其在 1 分鐘內(nèi)完全融化。

稀釋離心： 用酒精消毒管壁，將細(xì)胞懸液緩慢加入含 4-6 mL 預(yù)熱完全培養(yǎng)基的離心管中混勻。1000 rpm 離心 3-5 分鐘。

重懸接種： 棄去上清，加入適量完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種到 T25 培養(yǎng)瓶中。

靜置培養(yǎng)： 次日觀察細(xì)胞貼壁情況，建議更換新鮮培養(yǎng)基以去除殘留的 DMSO。

細(xì)胞傳代（當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 80%-90% 時(shí)）

棄液洗滌： 棄去舊培養(yǎng)基，用不含鈣鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

消化： 加入 0.25% 胰蛋白酶（Trypsin-EDTA，約 1-2 mL），放入 37℃ 培養(yǎng)箱消化 1-2 分鐘。

注意：TFK-1 細(xì)胞貼壁較牢，消化時(shí)間可能比普通細(xì)胞稍長，需在顯微鏡下觀察。

終止消化： 待細(xì)胞間隙變大、變圓脫落時(shí)，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。

離心分瓶： 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管，1000 rpm 離心 5 分鐘。棄上清，加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸，按 1:2 至 1:3 的比例分裝傳代。

細(xì)胞凍存

收集： 按傳代步驟收集處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞。

凍存液： 推薦使用 90% 完全培養(yǎng)基 + 10% DMSO，或者專用的無血清凍存液。

程序降溫： 將凍存管放入程序降溫盒，置于 -80℃冰箱 過夜，第二天轉(zhuǎn)入 液氮罐 長期保存。

關(guān)鍵注意事項(xiàng)（必讀）

貼壁較牢：

TFK-1 細(xì)胞屬于貼壁非常牢固的細(xì)胞。傳代時(shí)需要適當(dāng)?shù)囊让赶瘯r(shí)間，切勿強(qiáng)行吹打，以免損傷細(xì)胞膜。

生長速度：

該細(xì)胞生長速度屬于中等，倍增時(shí)間約為 24-48 小時(shí)。傳代后通常需要 2-3 天才能長滿。

運(yùn)輸狀態(tài)：

如果收到的是常溫運(yùn)輸?shù)幕罴?xì)胞（T25瓶），建議先在培養(yǎng)箱中靜置數(shù)小時(shí)（4小時(shí)左右）以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，不要立即開蓋。

應(yīng)用場(chǎng)景：

常用于研究膽管癌的侵襲與遷移機(jī)制、化療藥物敏感性以及信號(hào)通路研究。

總結(jié)

TFK-1 是研究人膽管癌的基礎(chǔ)工具。培養(yǎng)它的核心在于控制消化時(shí)間（因?yàn)橘N壁較牢）和耐心（因?yàn)樯L速度中等）。只要掌握好這兩點(diǎn)，它就能為你提供穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Rhesus antibody Rh RBM3 RNA結(jié)合基因蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml	C19orf45 英文名稱： 19號(hào)染色體開放閱讀框45抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Thr176) 0酸化胰島素受體底物1抗體 規(guī)格 0.1ml	Anti-FSH-R/FITC 熒光素標(biāo)記促卵泡刺激素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MRP7/ABCC10 多藥耐藥相關(guān)蛋白7抗體 規(guī)格 0.1ml	Anti-Phospho-NPM (Thr95) 0酸化核仁0酸蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CD5 英文名稱： CD5抗體 0.1ml	Beta-TG (Rabbit Beta-Thromboglobulin) ELISA Kit 兔子β血小板球蛋白/β環(huán)蛋白
IBTK 英文名稱： Bruton酪酸激酶抑制劑蛋白抗體 0.2ml	sFRP-4 英文名稱： 子宮內(nèi)膜抗體 0.1ml
Anti-phospho-CaMK2 alpha (Thr286) 0酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml	6-keto-PGF1a(Mouse 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 小鼠6酮素F1a
Uromucoid 英文名稱： 尿調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.1ml	ACS ELISA Kit 大鼠脂酰輔酶A合成酶
AFM 英文名稱： Alpha清蛋白抗體 0.2ml	Anti-GRM4/mGluR4 促代謝型谷氨酸受體4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr869/873/876) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化GRM2蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	人膽管癌細(xì)胞;TFK1HRP標(biāo)記沙丁胺醇單克隆抗體 小鼠單抗 0.3
Phospho-Beta Catenin (Ser675) 英文名稱： 0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 0.1ml	CD3(Rat Cluster of differentiation 3,CD3) ELISA Kit 大鼠CD3分子

細(xì)胞類型與特性

原代細(xì)胞：直接從組織中分離的細(xì)胞，通常指第1-10代細(xì)胞，具有接近體內(nèi)狀態(tài)的特性。

細(xì)胞系：原代細(xì)胞首次傳代成功后形成的細(xì)胞群，可連續(xù)傳代。

細(xì)胞株：從原代培養(yǎng)或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞，通常為第10-50代。

根據(jù)生長方式分為：

貼壁細(xì)胞：需附著在培養(yǎng)瓶表面生長，如成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞。

懸浮細(xì)胞：在培養(yǎng)基中自由懸浮生長，如血液細(xì)胞。

半貼壁半懸浮細(xì)胞：兼具貼壁和懸浮生長特性。