病毒DNA/RNA提取試劑盒(吸附柱法)
一、產(chǎn)品核心功能:
產(chǎn)品名稱 | 病毒DNA/RNA提取試劑盒(吸附柱法) | 分類 | 熒光PCR |
貨號 | XG-P1577 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
適用范圍:
樣本類型:血清、血漿、咽拭子、糞便、細胞培養(yǎng)上清、環(huán)境樣本(水體/表面拭子)。
病毒類型:兼容DNA病毒(如腺病毒、皰疹病毒)和RNA病毒(如流感病毒、SARS-CoV-2)。
提取目標:高效分離高純度病毒核酸(DNA/RNA),適用于qPCR、測序、基因分型等下游實驗。
二、技術(shù)原理與流程
裂解階段:
裂解液含 離液鹽(異硫氰酸胍) 和 去污劑,破壞病毒衣殼釋放核酸,同時抑制核酸酶活性。
結(jié)合階段:
在高鹽條件下,核酸通過氫鍵和靜電作用特異性結(jié)合硅膠膜吸附柱。
洗滌階段:
Buffer RW1:去除蛋白質(zhì)和脂類。
Buffer RW2(含乙醇):去除鹽分和小分子雜質(zhì)。
洗脫階段:
低鹽緩沖液(無核酸酶水或TE)洗脫,獲得純凈核酸(DNA/RNA可同步提?。?/p>
三、關(guān)鍵性能參數(shù)
指標 DNA參數(shù) RNA參數(shù)
得率 ≥90%(10^6病毒顆粒) ≥85%(10^6病毒顆粒)
純度(A260/A280) 1.7-2.0 1.8-2.1
靈敏度 ≤50 copies/反應(yīng) ≤50 copies/反應(yīng)
處理時間 20分鐘/樣本 25分鐘/樣本(含DNase處理)
四、注意事項與優(yōu)化策略
樣本處理:
復(fù)雜樣本(如糞便):需預(yù)離心或蛋白酶K消化(56℃ 15分鐘)。
液體樣本:體積不超過吸附柱結(jié)合容量(通?!?00 μL)。
抑制物控制:
血液樣本中血紅素或糞便多糖可能抑制PCR,建議:
加入 載體RNA(如poly-A)提高低載量樣本回收率。
洗脫前用 DNase/RNase-Free柱 空離去除殘留乙醇。
質(zhì)量控制:
每批次設(shè)置:
陰性對照(無核酸水)監(jiān)控污染。
陽性對照(已知濃度病毒核酸)驗證效率。
五、常見問題解答
Q:能否區(qū)分宿主與病毒核酸?
A:可通過 DNase I處理(提取RNA時)或 選擇性裂解(如Triton X-100裂解宿主細胞)。
Q:與磁珠法相比的優(yōu)劣?
吸附柱法:成本低、操作簡單,適合小通量;
磁珠法:自動化程度高,適合高通量(96孔板),但需專用設(shè)備。
Q:洗脫體積如何選擇?
常規(guī):30-50 μL(平衡濃度與得率);低載量樣本可減至20 μL以提高濃度。
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關(guān)鍵字: 病毒DNA/RNA;提取試劑盒;吸附柱法;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。