包納米蟲（Bona）檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
試劑簡介：
一、檢測目標(biāo)與流行病學(xué)意義
1.1 病原體特征
分類學(xué)：原生生物界（Protista），包納米蟲屬（Bonamia），主要致病種包括：
Bonamia ostreae（歐洲牡蠣包納米蟲）
Bonamia exitiosa（亞太地區(qū)主導(dǎo)種）
產(chǎn)品名稱 | 包納米蟲（Bona）檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） | 分類 | 熒光PCR |
貨號 | XG-P1589 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
靶基因選擇：
18S rRNA基因（屬保守區(qū)，檢測所有Bonamia spp.）
ITS-1區(qū)域（種特異性鑒別）
宿主范圍：
主要感染牡蠣（Ostrea、Crassostrea屬）
通過水體或活體運(yùn)輸傳播，幼體死亡率>90%
1.2 技術(shù)優(yōu)勢
三重檢測體系：
FAM：通用探針（18S rRNA）
HEX：B. exitiosa特異性探針
CY5：牡蠣EF1α內(nèi)參基因
靈敏度：1個寄生蟲/μL組織勻漿（比組織學(xué)檢測敏感100倍）
二、試劑盒組成與樣本處理
2.1 核心組分（48測試/盒）
組分 技術(shù)特性
核酸提取試劑 含蝸牛酶（Helicase）的軟體動物組織裂解系統(tǒng)
PCR預(yù)混液 含抗多糖抑制因子（針對牡蠣糖原含量高的特性）
引物探針組 三通道設(shè)計(jì)（兼容Roche LightCycler 96等機(jī)型）
質(zhì)控品 滅活B. exitiosa（陽性）、SPF牡蠣鰓組織（陰性）
2.2 樣本采集規(guī)范
最佳樣本：
瀕死牡蠣：鰓組織或血淋巴（寄生蟲載量最高）
無癥狀個體：消化腺穿刺取樣
保存運(yùn)輸：
立即檢測：4℃ RNAlater中保存≤72h
長期保存：液氮速凍后-80℃儲存
三、標(biāo)準(zhǔn)化檢測流程
3.1 操作步驟（全程約3小時）
核酸提?。?/p>
組織處理：50mg鰓組織+1mL裂解液（含β-巰基乙醇）
磁珠法純化（30μL洗脫體積）
qPCR擴(kuò)增：
反應(yīng)體系（20μL）：
預(yù)混液10μL + 探針混合液2μL + 模板5μL + 無核酸酶水3μL
循環(huán)程序：
95℃ 5min → 45×[95℃ 15sec → 60℃ 45sec]（三通道采集）
3.2 結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)
通道 Ct值范圍 判定依據(jù)
FAM(18S rRNA) ≤35 包納米蟲屬感染
HEX(ITS-1) ≤35 B. exitiosa特異性感染
CY5(內(nèi)參) 20-25 樣本質(zhì)量合格
四、質(zhì)量控制與技術(shù)創(chuàng)新
4.1 質(zhì)控要點(diǎn)
抑制物監(jiān)控：內(nèi)參Ct值>25需稀釋復(fù)測
交叉驗(yàn)證：
陽性樣本建議吉姆薩染色（2-5μm圓形原生質(zhì)體）
臨界值樣本需克隆測序（ITS-1區(qū)）
4.2 2025年升級
微流控現(xiàn)場版：
集成核酸提取與檢測（1小時完成）
適配水產(chǎn)碼頭快速篩查
數(shù)字PCR定量：
科研版可檢測0.1%的隱性感染率
五、應(yīng)用與生物安全
5.1 典型場景
種苗檢疫：
進(jìn)口牡蠣幼體篩查（OIE必檢項(xiàng)目）
育苗池定期監(jiān)測
生態(tài)研究：
野生種群攜帶率調(diào)查
5.2 注意事項(xiàng)
滅活處理：陽性樣本需121℃高壓30分鐘
引物更新：
每兩年比對GenBank新序列（如2024年B. ostreae變異株）
公司正在出售的產(chǎn)品：
肝癌蛋白剪接變異體蛋白抗體 | 細(xì)菌乳糖酵解溴百里酚藍(lán)（BTB）瓊脂平板 |
組織相容性復(fù)合體蛋白1單克隆抗體 | 細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 |
脫氧胸苷酸激酶DTYMK抗體 | 冰凍切片肥大細(xì)胞（MAST CELL）天青A（Azure A） |
類表皮生長因子域7抗體 | β晶體體蛋白A2抗體 |
細(xì)胞堿性磷酸酶活性比色法定量檢測試劑盒 | H2-Q10蛋白多克隆抗體 |
食物總抗氧化能力（TAC）化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 | DIP2B蛋白抗體 |
糖果糖精（saccharin）含量比色法定量檢測試劑盒 | 腦腸肽O?；D(zhuǎn)移酶/Ghrelin O acyltransferase抗體 |
冰凍切片組織P27蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 | 成纖維細(xì)胞生長因子19抗體 |
蛋類羥丁酸待測樣品處理試劑盒 | 嗅覺受體ai1抗體 |
組織FLT3激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | 2號染色體開放閱讀框50抗體 |
石蠟切片神經(jīng)纖維銀染（Bodian）試劑盒 | 包納米蟲（Bona）檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）活體細(xì)胞半胱-3（CASPASE-3）活性原位熒光染色檢測試劑盒 |
線蟲乙烷亞硝基脲（ENU）誘導(dǎo)突變試劑盒 | 細(xì)胞角蛋白9重組兔單克隆抗體 |
肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2B抗體 | PE-Cy7標(biāo)記小鼠CD62L單克隆抗體 |
關(guān)鍵字： 包納米蟲;檢測試劑盒;PCR-熒光探針法;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。