H5N1 亞型禽流感病毒檢測試劑盒
1. 檢測原理：
該試劑盒基于 TaqMan 熒光探針法（Real-time RT-PCR）。
雙重靶標(biāo)設(shè)計（亞型特異性）： 為了精準(zhǔn)鎖定 H5N1 病毒，試劑盒通常采用雙重?zé)晒?PCR技術(shù)，同時檢測兩個基因：
FAM 通道（H5 基因）： 針對 H5 亞型流感病毒的血凝素（HA）基因保守序列。
HEX/VIC 通道（N1 基因）： 針對 N1 亞型流感病毒的神經(jīng)氨酸酶（NA）基因保守序列。
產(chǎn)品名稱 | H5N1 亞型禽流感病毒檢測試劑盒 | 分類 | 熒光PCR |
貨號 | XG-P1666 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
檢測機制： 試劑盒利用逆轉(zhuǎn)錄酶將病毒 RNA 轉(zhuǎn)化為 cDNA，再通過 Taq 酶進行擴增。只有當(dāng)樣本中同時檢測到 H5 和 N1 的特異性熒光信號時，才能確診為 H5N1 亞型禽流感病毒感染，這有效避免了與其他亞型（如 H5N2 或 H9N1）的混淆。
2. 檢測目標(biāo)與應(yīng)用
目標(biāo)病原： 高致病性禽流感病毒 H5N1 亞型（AIV-H5N1）。
應(yīng)用領(lǐng)域：
動物疫病監(jiān)測： 用于家禽養(yǎng)殖場、活禽交易市場的日常監(jiān)測和凈化。
臨床輔助診斷： 用于疑似高致病性禽流感（“雞瘟”）感染禽類的快速確診。
公共衛(wèi)生監(jiān)測： 用于監(jiān)測 H5N1 病毒向人的跨種傳播風(fēng)險。
樣本類型： 咽喉拭子、泄殖腔拭子、血液、肺臟、脾臟等組織勻漿液。
3. 試劑盒組成（典型配置）
根據(jù)市場主流品牌的配置，試劑盒通常包含以下組分：
組分名稱 規(guī)格/含量 作用
RT-PCR 反應(yīng)液 / Master Mix 1 mL x 1管 (紅蓋) 含 dNTPs、緩沖液、Mg2等
酶混合液 (Enzyme Mix) 100 μL x 1管 (紅蓋/黑蓋) 含逆轉(zhuǎn)錄酶、熱啟動 Taq 酶
引物/探針混合液 100 μL x 1管 (白蓋) 針對 H5 和 N1 亞型特異性設(shè)計
陽性對照 (Positive Control) 50 μL x 1管 (黃蓋) 含 H5N1 靶基因的質(zhì)粒 (1×10^8 拷貝/μL)
陰性對照 (Negative Control) 1 mL x 1管 (亮黃色/藍(lán)蓋) 無菌超純水
說明書 1 份 操作指南和參數(shù)說明
注：部分試劑盒可能將引物探針與反應(yīng)液預(yù)混，或包含內(nèi)標(biāo)（Internal Control）以監(jiān)控 PCR 抑制。
4. 操作流程簡述
樣本處理： 采集拭子或組織樣本，使用病毒 DNA/RNA 提取試劑盒提取病毒 RNA。
試劑配制（冰上操作）： 按照說明書比例（如 N+2 法，N 為樣本數(shù)）混合反應(yīng)液、酶和引物探針，分裝到 PCR 管中。
加樣： 向分裝好的反應(yīng)管中分別加入 5-10 μL 的模板 RNA（樣本、陰性對照、陽性對照）。
上機擴增： 將 PCR 管放入熒光定量 PCR 儀中。
5. 反應(yīng)程序與結(jié)果判讀
推薦反應(yīng)程序：
逆轉(zhuǎn)錄： 50℃，15-30 分鐘。
預(yù)變性： 95℃，5-10 分鐘。
PCR 循環(huán)： 95℃ 15 sec → 60℃ 30-45 sec（收集熒光），40-45 個循環(huán)。
結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)：
陽性（+）：
FAM 通道和 HEX 通道均出現(xiàn)典型的 S 型擴增曲線。
且 Ct 值 ≤ 35（或說明書設(shè)定的閾值）。
結(jié)論：樣本中檢出 H5N1 亞型禽流感病毒核酸。
陰性（-）：
FAM 和 HEX 通道均無 Ct 值，或 Ct 值 > 35。
結(jié)論：樣本中未檢出 H5N1 亞型禽流感病毒核酸。
單重陽性（疑似/其他）：
僅 H5 陽性：提示可能存在 H5Nx（非 N1）亞型感染。
僅 N1 陽性：提示可能存在 HxN1（非 H5）亞型感染。
實驗有效性：
陽性對照： FAM 和 HEX 通道均需有明顯擴增（Ct 值在預(yù)期范圍內(nèi)）。
陰性對照： 無擴增曲線。
公司正在出售的產(chǎn)品：
干擾素alpha 5蛋白抗體 | HSV（HERPES SIMPLX）病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴增檢測試劑盒 |
腫瘤抑制基因Testin抗體 | 冰凍切片組織PDGF-A蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 |
羧基端小結(jié)構(gòu)域磷酸酶2抗體 | 組織單胺氧化酶（MAO）總活性比色法定量檢測試劑盒 |
淋巴細(xì)胞趨化因子CCL2抗體 | ZSWIM5蛋白抗體 |
組織C-MET激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | G蛋白偶聯(lián)受體HM74蛋白抗體 |
熒光標(biāo)記法組織端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒 | ECO1蛋白抗體 |
超強包涵體蛋白溶解試劑盒 | 錨蛋白重復(fù)域6抗體 |
鈣ATP酶PMCA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 | 膽堿磷酸轉(zhuǎn)移酶1抗體 |
食物果聚糖酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒 | 早老素蛋白1+2抗體 |
組織PKCε激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | APC標(biāo)記人CD158d (KIR2DL4)單克隆抗體 |
磷酸二酯酶2（Phosphodiesterase 2） | H5N1 亞型禽流感病毒檢測試劑盒Mallory蘇木素（PTAH）復(fù)染試劑盒 |
HCV（HEPATITIS VIRUS C）病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴增檢測試劑盒 | 外殼蛋白COPE單克隆抗體 |
激素上調(diào)神經(jīng)腫瘤相關(guān)激酶抗體 | PE-Cy5標(biāo)記小鼠CD11b單克隆抗體 |
關(guān)鍵字： H5N1 亞型禽流感病毒;檢測試劑盒;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。