H5/H7 亞型禽流感病毒檢測試劑盒
試劑簡介：
檢測目標：
FAM通道： H5亞型禽流感病毒（靶向HA基因）。
VIC/HEX通道： H7亞型禽流感病毒（靶向HA基因）。
注：部分試劑盒可能包含內(nèi)源性內(nèi)標（IC）通道，用于監(jiān)控提取過程。
產(chǎn)品名稱 | H5/H7 亞型禽流感病毒檢測試劑盒 | 分類 | 熒光PCR |
貨號 | XG-P1668 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
主要應用：
獸醫(yī)診斷： 家禽（雞、鴨、鵝）的臨床樣本檢測。
環(huán)境監(jiān)測： 活禽交易市場、養(yǎng)殖場環(huán)境（糞便、污水、籠具）的病原學監(jiān)測。
科研與檢疫： 病毒分離株的鑒定、流行病學調(diào)查。
2. 檢測原理
該試劑盒采用雙重實時熒光定量RT-PCR（TaqMan探針法）技術(shù)：
一步法反應： 在同一個PCR反應管中，同時進行逆轉(zhuǎn)錄（RT）和PCR擴增。
雙重檢測： 反應體系中包含兩組特異性引物和探針。
H5特異性探針： 5'端標記FAM熒光素。
H7特異性探針： 5'端標記VIC（或HEX）熒光素。
信號分離： 儀器實時監(jiān)測不同通道的熒光信號，從而判斷樣本中是否含有H5、H7或兩者共感染。
3. 試劑盒組成 (以50測試規(guī)格為例)
組分名稱 規(guī)格/體積 保存條件 功能說明
H5/H7 PCR反應液 含引物/探針/dNTPs -20℃避光 預混液，包含H5和H7的特異性引物探針
酶混合液 含逆轉(zhuǎn)錄酶/Taq酶 -20℃ 催化逆轉(zhuǎn)錄和擴增反應
陽性對照 (混合) 50μL x 1管 -20℃ 含H5和H7目的基因的質(zhì)?；旌衔?/p>
陰性對照 250μL x 1管 4℃或-20℃ 無菌雙蒸水或緩沖液
說明書 1份 常溫 操作指南及判讀標準
4. 操作流程詳解
第一步：樣本采集與處理
樣本類型：
拭子： 咽喉拭子、泄殖腔拭子。
組織： 脾、肺、氣管、腦等臟器。
液體： 糞便懸液、氣管沖洗液、雞胚尿囊液。
處理方法：
拭子/組織需在PBS緩沖液中充分研磨、離心，取上清液作為待檢樣本。
第二步：核酸提取
方法： 使用配套的病毒RNA提取試劑盒（磁珠法或離心柱法）。
關鍵： 提取的RNA應溶解在無酶水中，避免含有PCR抑制劑。
第三步：PCR反應體系配制
解凍： 將反應液和酶液在冰上解凍，振蕩混勻并瞬時離心。
配制： 按說明書比例混合PCR反應液和酶混合液。
分裝： 將混合液分裝至PCR反應管中（通常為20μL體系）。
第四步：加樣
向反應管中加入提取好的RNA模板（通常為5-10 μL）。
注意： 設置陰性對照和陽性對照，加樣過程需在冰上操作。
第五步：上機擴增
儀器： ABI 7500、LightCycler 480、Bio-Rad CFX96等。
通道設置：
Reporter Dye: FAM (H5), VIC/HEX (H7)
Quencher Dye: None
程序（參考）：
逆轉(zhuǎn)錄： 50℃ 10-15 min (1 cycle)
預變性： 95℃ 3-5 min (1 cycle)
PCR循環(huán)： 95℃ 15 sec → 60℃ 30-45 sec (40-45 cycles，采集熒光)
5. 結(jié)果判讀標準
有效實驗判定：
陰性對照： FAM和VIC通道均無Ct值（或Ct值 > 40）。
陽性對照： FAM和VIC通道均有明顯的擴增曲線，且Ct值符合說明書范圍。
樣本結(jié)果判定：
H5 (FAM通道) H7 (VIC通道) 結(jié)果判讀 解釋
Ct ≤ 35 Ct > 40 H5 陽性 感染H5亞型禽流感病毒
Ct > 40 Ct ≤ 35 H7 陽性 感染H7亞型禽流感病毒
Ct ≤ 35 Ct ≤ 35 混合感染 同時感染H5和H7亞型 (罕見)
Ct > 40 Ct > 40 陰性 未檢測到H5或H7亞型
公司正在出售的產(chǎn)品：
鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體 | 細胞HSV（HERPES SIMPLX）病毒定量PCR擴增檢測試劑盒 |
腫瘤血管內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白Robo4抗體 | 細胞PDGF-B蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 |
唾液酸轉(zhuǎn)移酶1/α-2,6唾液酸轉(zhuǎn)移酶抗體 | 血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性熒光定量檢測試劑盒 |
淋巴細胞特異性轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 | ZSCAN1蛋白抗體 |
組織BMK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | G蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體 |
銀染法細胞端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒 | erbB3結(jié)合蛋白1抗體 |
真菌/酵母細胞可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒 | 膜相關蛋白Numb抗體 |
細胞CASPASE-6蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒 | 膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體 |
食物纖維素比色法定量檢測試劑盒 | 胰島素基因增強結(jié)合蛋白2抗體 |
組織丙酮酸羧化酶（PEPCase）活性酶耦聯(lián)比色法定量檢測試劑盒 | ATP5E蛋白抗體 |
GST融合蛋白同位素（[γ32P]ATP）激酶標記試劑盒 | H5/H7 亞型禽流感病毒檢測試劑盒免疫熒光細胞流式儀直接檢測試劑盒（含熒光一抗） |
線蟲β－半乳糖苷酶原位染色試劑盒 | AF680標記的程序性死亡配體1抗體 |
基質(zhì)交感分子2抗體 | PE-Cy5標記小鼠CD25單克隆抗體 |
關鍵字： H5/H7 亞型禽流感病毒;檢測試劑盒;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術(shù)服務、免疫學和分子學產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應性好、模塊搭配靈活，能快速響應客戶需求的產(chǎn)品。