產(chǎn)品信息：

NCI-H1703 是非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中肺鱗癌研究的重要模型，而 NCI-H1703-Luc 是在其基礎(chǔ)上通過基因工程手段穩(wěn)定表達(dá)了熒光素酶（Luciferase, LUC）的改造株。該細(xì)胞系保留了親本細(xì)胞的生物學(xué)特性，同時(shí)具備了活體示蹤能力，廣泛應(yīng)用于肺癌的藥物篩選、腫瘤生長(zhǎng)抑制及轉(zhuǎn)移機(jī)制研究。

親本來源：NCI-H1703 (人肺鱗癌細(xì)胞)

種屬來源：人（Homo sapiens）

組織來源：肺（Lung）

供體信息：54歲男性，非小細(xì)胞肺癌（鱗癌）患者，吸煙史

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

標(biāo)記基因：LUC（熒光素酶，用于生物發(fā)光成像）

培養(yǎng)基：RPMI-1640 + 10% FBS

細(xì)胞特性與應(yīng)用

特征維度  詳細(xì)描述

背景簡(jiǎn)介  該細(xì)胞系于1987年建系，源自一位54歲患有非小細(xì)胞肺癌的白人男性患者。

熒光特性  細(xì)胞表達(dá)熒光素酶，需加入底物（熒光素）后在IVIS成像系統(tǒng)或酶標(biāo)儀中檢測(cè)生物發(fā)光信號(hào)。

主要應(yīng)用  1. 肺癌的活體成像與腫瘤生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)。

2. 抗腫瘤藥物的體內(nèi)/體外藥效評(píng)價(jià)。

3. 腫瘤轉(zhuǎn)移及定植機(jī)制研究。

推薦培養(yǎng)體系

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：RPMI-1640 (不含 HEPES)

血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)

雙抗添加：1% 青霉素-鏈霉素 (P/S)

培養(yǎng)環(huán)境：

溫度：37℃

氣體環(huán)境：95% 空氣 + 5% CO

濕度：維持培養(yǎng)箱內(nèi)濕度 >90%。

詳細(xì)培養(yǎng)操作指南

1. 細(xì)胞復(fù)蘇 (Thawing)

預(yù)熱：將水浴鍋調(diào)至 37℃，預(yù)熱完全培養(yǎng)基。

解凍：從液氮中取出凍存管，迅速放入 37℃ 水浴中，1-2 分鐘內(nèi)快速搖晃融化。

轉(zhuǎn)移：用 75% 酒精擦拭凍存管外壁消毒，轉(zhuǎn)入超凈臺(tái)。

稀釋：將細(xì)胞懸液緩慢加入含有 4-6 mL 預(yù)熱完全培養(yǎng)基的離心管中（稀釋 DMSO 毒性）。

離心：1000 rpm (約 250g) 離心 3-5 分鐘。

接種：棄上清，加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸，接種至 T25 培養(yǎng)瓶中，放入培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。

2. 細(xì)胞傳代 (Passage)

NCI-H1703-Luc 為貼壁細(xì)胞。

觀察：當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80%-90% 時(shí)進(jìn)行傳代。

清洗：棄去舊培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的 PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞 1 次。

消化：加入適量消化液（0.25% Trypsin-0.53mM EDTA，約 1 mL），37℃ 培養(yǎng)箱消化 1-2 分鐘。

鏡下觀察：顯微鏡下觀察，待細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)。

終止：加入含血清的完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打混勻。

離心：1000 rpm 離心 4-5 分鐘。

重懸與分瓶：棄上清，加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸，按 1:2 到 1:3 的比例進(jìn)行分瓶傳代。

3. 細(xì)胞凍存 (Freezing)

狀態(tài)選擇：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行凍存。

消化：棄去培養(yǎng)基，加入少量胰酶消化，待細(xì)胞變圓脫落。

收集：加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，混勻后轉(zhuǎn)移至離心管。

離心：1000 rpm 離心 5-10 分鐘，棄上清。

重懸：加入配置好的凍存液（90% 完全培養(yǎng)基 + 10% DMSO）重懸細(xì)胞。

分裝：轉(zhuǎn)移至凍存管中，放入程序降溫盒（-80℃ 過夜），隨后轉(zhuǎn)入液氮罐長(zhǎng)期保存。

關(guān)鍵注意事項(xiàng)

貼壁特性：NCI-H1703 細(xì)胞貼壁較為牢固，但傳代后貼壁速度可能較慢。傳代時(shí)需確保吹打均勻，防止細(xì)胞成團(tuán)。

運(yùn)輸脫落：由于運(yùn)輸震蕩，部分細(xì)胞可能會(huì)從瓶壁脫落。若收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)瓶底有漂浮細(xì)胞團(tuán)，屬正?，F(xiàn)象。請(qǐng)將瓶?jī)?nèi)液體轉(zhuǎn)移至離心管，離心收集細(xì)胞，棄上清，用 PBS 清洗一次，再用完全培養(yǎng)基重懸后接種回培養(yǎng)瓶中。

無菌操作：所有操作必須在生物安全柜內(nèi)嚴(yán)格無菌操作。

支原體檢測(cè)：建議定期檢測(cè)支原體，確保細(xì)胞無污染。

公司正在出售的產(chǎn)品：

AQP-1 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1	Anti-Phospho-FHIT (Tyr114) /FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化脆性組氨酸三聯(lián)體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Beta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42) 0.1mg	phospho-delta 1 Catenin (Tyr228) 英文名稱： 0酸化δ連環(huán)蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml	Anthrax Paper antigen 健康皮張?zhí)烤铱乖?1ml
Rhesus antibody Rh TP53I8/EI24 蛋白p53誘導(dǎo)蛋白8 規(guī)格 0.1ml	Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)半胱酸肽酶4
Anti-SCP2/NLTP/FITC 熒光素標(biāo)記固醇攜帶蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	BMP-6 ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6
Rhesus antibody Rh SMAD9 SMAD家族9抗體 規(guī)格 0.2ml	NFIC 英文名稱： 核因子1C型抗體 0.2ml
ACBD6 Kit Human 人 ACBD6 ELISA配對(duì)抗體 ELISA	Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-pig IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗豬IgG 規(guī)格 0.3ml
Anti-CHK1 細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	CD146/MCAM 細(xì)胞粘附分子CD146抗原 0.5mg
Beta arrestin 2 英文名稱： β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體 0.1ml	人肺鱗癌細(xì)胞-LUC;NCI-H1703-LucAnti-phospho-PAK1/2/3(Thr423) 0酸化p21激活激酶1/2/3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
LONP1 英文名稱： 線粒體離子肽酶1抗體 0.2ml	(Mouse anti-IVIgG antibody) ELISA Kit 小鼠抗IVIgG抗體

不同類型細(xì)胞的特異性（生物特性差異）

不同類型細(xì)胞的特異性（生物特性差異）

形態(tài)多樣性：細(xì)胞形態(tài)因功能而異，如成纖維細(xì)胞呈梭形或多角形，神經(jīng)細(xì)胞有突起，上皮細(xì)胞呈多邊形緊密排列；細(xì)菌細(xì)胞多為球形、桿狀或螺旋形。

功能特異性：動(dòng)物細(xì)胞依賴線粒體供能，植物細(xì)胞具葉綠體進(jìn)行光合作用；原核細(xì)胞（如細(xì)菌）無細(xì)胞核，真核細(xì)胞（如動(dòng)植物細(xì)胞）有核膜包裹的核；某些細(xì)胞如酵母細(xì)胞可進(jìn)行出芽生殖，哺乳動(dòng)物細(xì)胞則通過有絲分裂增殖。

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞需附著表面生長(zhǎng)（如成纖維細(xì)胞），懸浮細(xì)胞可在培養(yǎng)液中自由生長(zhǎng)（如血液細(xì)胞）；不同細(xì)胞分裂速度各異，如腫瘤細(xì)胞增殖較快，正常體細(xì)胞分裂較慢。