商品屬性
產(chǎn)品名稱 | LN229+LUC人膠質(zhì)瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 | 英文名稱 | LN229+LUC |
規(guī)格 | 1×106 | 貨號(hào) | P-X821 |
母系來源 LN229 (人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
標(biāo)記基因 Luciferase (熒光素酶)
抗性基因 通常攜帶 Puro (嘌呤霉素) 抗性
物種來源 人 (Homo sapiens)
組織來源 腦 (額頂枕葉膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
標(biāo)記類型：穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶（Firefly Luciferase, LUC）
應(yīng)用：腫瘤研究、體內(nèi)外生物發(fā)光成像（BLI）、藥物篩選、轉(zhuǎn)移模型構(gòu)建等。
規(guī)格：
凍存細(xì)胞：1 × 10^6 cells/vial
培養(yǎng)狀態(tài)細(xì)胞：T25培養(yǎng)瓶（貼壁生長(zhǎng)，80%密度）
儲(chǔ)存條件：液氮（凍存細(xì)胞）或37℃培養(yǎng)（活細(xì)胞）
關(guān)鍵特性
熒光素酶活性：
穩(wěn)定表達(dá)Firefly Luciferase基因，可通過D-熒光素底物產(chǎn)生生物發(fā)光信號(hào)。
推薦底物：150 μg/mL D-Luciferin（需單獨(dú)購買）。
細(xì)胞背景：
親本細(xì)胞LN229：人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系，EGFR擴(kuò)增、PTEN突變，常用于腫瘤侵襲和放療研究。
標(biāo)記方法：慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)或質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，經(jīng)抗生素（如Puromycin）篩選獲得穩(wěn)定株。
檢測(cè)數(shù)據(jù)：
發(fā)光強(qiáng)度：約1×10^8 RLU/10^6 cells（需驗(yàn)證儀器條件）。
穩(wěn)定性：連續(xù)傳代10代后熒光素酶活性保持>90%。
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：DMEM（高糖）+ 10% FBS + 1% Pen/Strep + [篩選抗生素，如2 μg/mL Puromycin]。
培養(yǎng)環(huán)境：37℃, 5% CO?。
傳代比例：1:3至1:5（每2-3天傳代，80%匯合時(shí)）。
質(zhì)量控制
無菌檢測(cè)：支原體、細(xì)菌、真菌陰性（ELISA/PCR驗(yàn)證）。
熒光素酶表達(dá)：流式細(xì)胞術(shù)或發(fā)光檢測(cè)確認(rèn)>95%陽性率。
實(shí)驗(yàn)流程示例（體內(nèi)成像）
細(xì)胞準(zhǔn)備：皮下或原位注射LN229-LUC細(xì)胞（如5×10^5 cells/小鼠）。
成像步驟：
注射D-Luciferin（150 mg/kg，腹腔注射）。
10分鐘后用IVIS成像系統(tǒng)檢測(cè)發(fā)光信號(hào)。
注意事項(xiàng)
凍存細(xì)胞復(fù)蘇后需穩(wěn)定培養(yǎng)1-2代再實(shí)驗(yàn)。
長(zhǎng)期培養(yǎng)建議定期用抗生素維持篩選壓力。
避免反復(fù)凍融，推薦使用專業(yè)細(xì)胞凍存液（如90% FBS + 10% DMSO）。
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關(guān)鍵字： LN229+LUC;人膠質(zhì)瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記;
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