人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP
商品屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP | 英文名稱(chēng) | A375-LUC-EGFP |
規(guī)格 | 1×106 | 細(xì)胞形態(tài) | 貼壁生長(zhǎng) |
貨號(hào) | P-X11324 | 細(xì)胞生長(zhǎng) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景特性：由A375細(xì)胞系經(jīng)基因改造，穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶（LUC）和增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP），適用于活體成像、腫瘤轉(zhuǎn)移及藥物篩選研究。
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)，遺傳改造后具有無(wú)限增殖潛能，需定期檢測(cè)基因穩(wěn)定性。
純度要求：細(xì)胞純度≥90%，經(jīng)檢測(cè)不含HIV、HBV、HCV、支原體及細(xì)菌污染。
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：DMEM（高糖）+ 10%胎牛血清（FBS）+ 1%青霉素-鏈霉素雙抗。
培養(yǎng)環(huán)境：37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。
凍存條件：無(wú)血清凍存液（含10% DMSO），液氮長(zhǎng)期保存。
細(xì)胞處理與傳代
細(xì)胞復(fù)蘇與接收
運(yùn)輸狀態(tài)：凍存管（干冰運(yùn)輸）或貼壁培養(yǎng)瓶（灌滿(mǎn)培養(yǎng)基密封）。
接收操作：
凍存細(xì)胞：37℃水浴快速?gòu)?fù)蘇，離心后重懸接種。
貼壁細(xì)胞：75%酒精消毒瓶身，靜置3-4小時(shí)穩(wěn)定狀態(tài)后觀察。
質(zhì)檢要求：顯微鏡下拍照記錄（40×、100×、200×），前3天狀態(tài)為售后依據(jù)。
傳代步驟（匯合度80%時(shí)進(jìn)行）
棄舊培養(yǎng)基，PBS（無(wú)Ca2?/Mg2?）潤(rùn)洗1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶1-2ml，37℃消化1-2分鐘（鏡下觀察細(xì)胞變圓后終止）。
加入新鮮培養(yǎng)基終止消化，輕柔吹打形成單細(xì)胞懸液。
按1:2至1:3比例分瓶，原培養(yǎng)基對(duì)比培養(yǎng)以評(píng)估適應(yīng)性。
注意事項(xiàng)
穩(wěn)定性監(jiān)測(cè)：EGFP/LUC表達(dá)需定期驗(yàn)證（如熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)）。
污染防控：嚴(yán)格無(wú)菌操作，建議使用原廠(chǎng)配套培養(yǎng)基減少適應(yīng)性差異。
實(shí)驗(yàn)建議：傳代后24小時(shí)內(nèi)避免處理，確保細(xì)胞貼壁恢復(fù)。
應(yīng)用提示
活體成像：接種裸鼠前需確認(rèn)熒光素酶活性（如D-熒光素鉀鹽底物）。
文獻(xiàn)參考：建議查閱ATCC或相關(guān)論文獲取特定實(shí)驗(yàn)參數(shù)（如接種密度、藥物處理濃度）。
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關(guān)鍵字： 人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375-LUC-EGFP;
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