磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)測(cè)定試劑盒/分光光度法/48樣
測(cè)定意義：
PEPCK（EC4.1.1.32）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和細(xì)胞中，催化草酰乙酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸，是調(diào)節(jié)糖異生途徑的關(guān)鍵酶。
測(cè)定原理：
PEPCK 催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和 CO2 ，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化 NADH 氧化生成 NAD+ ，在 340nm 下測(cè)定 NADH 下降速率，即可反映 PEPCK 活性。
自備儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
測(cè)定步驟：
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm，蒸餾水調(diào)零。
2 、 工作液的配制：臨用前將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
3 、 試劑四的配制：臨用前加入 2.5mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
4 、 將工作液和試劑四置于 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 5 分鐘。
5 、 在 1mL 石英比色皿中加入 50μL 樣本、50μL 試劑四和900μL 工作液，立即混勻，記錄 340nm 處初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2 ，計(jì)算 ΔA=A1-A2。
注 意：
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
關(guān)鍵字： PEPCK試劑盒 ; PEPCK ELISA KIT ; PEPCK ELISA試劑盒 ;
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