乙酰膽堿酯酶(AchE)測(cè)定試劑盒/微量法/96S

測(cè)定意義：

AchE 屬于絲氨酸水解酶，廣泛存在于各種動(dòng)物組織和血清中。AchE 催化乙酰膽堿（Ach）水解，在神經(jīng)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)中起重要作用。

測(cè)定原理：

AchE 催化 Ach 水解生成膽堿，膽堿與二硫?qū)ο趸郊姿幔―TNB）作用生成 5-巰基-硝基苯甲酸（TNB）； TNB 在 412nm 處有吸收峰，通過(guò)測(cè)定 412 nm 吸光度增加速率，計(jì)算 AchE 活性。

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。

測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min ，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 412 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二置于 37℃水浴中預(yù)熱 30min。

3. 取微量石英比色皿/96 孔板，依次加入 20μL 上清液、160 μL 試劑二、10μL 試劑三和 10μL 試劑四，迅速混勻，于 412nm 處測(cè)定3min 內(nèi)吸光值變化，第 10s 吸光值記為 A1 ，第 190s 吸光值記為 A2 ?！鰽 測(cè)定管 =A2-A1。

注 意：

正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。