COLO 320HSR人結(jié)腸癌細(xì)胞
產(chǎn)品信息：

1. 細(xì)胞基本檔案

物種來源  人 (Homo sapiens)

供體信息  33歲男性

組織來源  結(jié)直腸 (Colorectal)

病理類型  腺癌 (Adenocarcinoma)

生長特性  半貼壁生長 (Semi-adherent / Loose attachment)

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣 (Epithelial)

生物安全  1級/2級 (僅限科研)

培養(yǎng)條件與操作流程

基礎(chǔ)培養(yǎng)體系

基礎(chǔ)培養(yǎng)基：DMEM (高糖) 或 RPMI-1640（不同供應(yīng)商推薦略有差異，DMEM 更常見）。

添加成分：

10% 胎牛血清 (FBS)。

1% 青霉素-鏈霉素 (雙抗)。

培養(yǎng)環(huán)境：37℃，5% CO?，濕度飽和。

傳代操作（半貼壁細(xì)胞的特殊技巧）

由于 COLO 320HSR 既有一部分貼壁不牢的細(xì)胞，也有懸浮細(xì)胞，操作時需要“收集體”：

觀察：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 80% - 90% 時進(jìn)行傳代。

收集懸浮細(xì)胞：首先輕輕晃動培養(yǎng)瓶，將漂浮在培養(yǎng)基中的細(xì)胞懸液收集到離心管中。

清洗與消化貼壁細(xì)胞：

用 PBS 洗去死細(xì)胞。

加入少量 0.25% 胰蛋白酶-EDTA，放入37℃培養(yǎng)箱消化 1-2分鐘。由于這株細(xì)胞貼壁很松，通常很快就會脫落。

終止與合并：加入完全培養(yǎng)基終止消化，并將消化下來的貼壁細(xì)胞懸液與之前收集的懸浮細(xì)胞合并。

離心：將混合懸液 1000 rpm 離心 3-5分鐘。

重懸與分瓶：棄上清，加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸，按 1:2 至 1:4 的比例分裝。

凍存操作

凍存液配方：90% FBS + 10% DMSO（傳統(tǒng)配方）或?qū)Ｓ脽o血清凍存液。

密度：建議凍存密度為 1×10? 個細(xì)胞/mL 以上。

?? 3. 核心注意事項（避坑指南）

1. 細(xì)胞“脫落”是正常的

這是該細(xì)胞系最大的特點。在培養(yǎng)過程中，你會經(jīng)?？吹酱罅考?xì)胞漂浮在培養(yǎng)基中。只要細(xì)胞折光性好、邊緣清晰，這就是正?，F(xiàn)象，不要誤以為是污染或細(xì)胞死亡而扔掉。

2. 運輸與復(fù)蘇（常溫運輸為主）

常溫運輸（T25瓶）：收到后用75%酒精擦拭瓶壁，放入37℃培養(yǎng)箱靜置 2-4小時 以穩(wěn)定狀態(tài)。

靜置觀察：收到后不要立即晃動瓶子。靜置后，大部分漂浮的細(xì)胞會重新沉降或貼壁。如果瓶底細(xì)胞密度較高，可直接傳代。

3. 消化時間控制

因為細(xì)胞貼壁不牢，消化時間通常比普通貼壁細(xì)胞短得多。鏡下觀察到細(xì)胞間隙變大、部分變圓即可終止消化，過度消化容易導(dǎo)致細(xì)胞活性下降。

?? 4. 應(yīng)用場景

結(jié)直腸癌機(jī)制研究：研究腫瘤的增殖、凋亡及信號通路。

藥物篩選：常用于評估抗腫瘤藥物（特別是針對結(jié)直腸癌的藥物）的體外活性。

耐藥性研究：該細(xì)胞系常用于研究 5-FU（氟尿嘧啶）等藥物的耐藥機(jī)制。

公司正在出售的產(chǎn)品：

IL-1 Alpha (Human Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit 人白介素1αMulti-class antibodies規(guī)格： 48T	Anti-CD107a/LAMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Pdx1/FITC 熒光素標(biāo)記胰十二指腸同源異型盒基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	Anti-HDAC7 組蛋白去乙?；?抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-MMP-15 基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml	phospho-c-Abl(Tyr276) 英文名稱： 0酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體 0.1ml
Anti-phospho-STAT1(pThr701)/FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	Gal(Human Alpha-galactoyl) ELISA Kit 人α半乳糖基抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HOXc8/FITC 熒光素標(biāo)記同源盒基因的一種抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	Anti-ANGPTL4/ANG-4 /FITC 熒光素標(biāo)記位蛋白樣4/生成素樣蛋白-4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM81A FAM81A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml	CCA(Human Colon Cancer Antigen) ELISA Kit 人癌抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
CH ELISA Kit 大鼠膽固醇Multi-class antibodies規(guī)格： 48T	IL-11 人白介素-11Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Rhesus antibody Rh Bag1/RAP46 抑凋亡基因bag1抗體 規(guī)格 0.1ml	Cyt-C ELISA Kit 大鼠細(xì)胞色素CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 人αL巖藻糖苷酶	COLO 320HSR人結(jié)腸癌細(xì)胞Rhesus antibody Rh DECTIN-1/CLECSF12/beta Glucan Receptor β葡聚糖受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-VPS18 空泡分選蛋白18抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh CIP2A/p90 Autoantigen 蛋酸酶PP2A癌抑制蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

細(xì)胞具體特點如下：

環(huán)境與營養(yǎng)：需無菌環(huán)境、精確的溫度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），動物細(xì)胞常需血清，植物細(xì)胞需激素。

生長方式：貼壁細(xì)胞需表面附著，懸浮細(xì)胞自由漂浮，半貼壁半懸浮兼具兩者特性。

傳代與密度：貼壁細(xì)胞需胰酶消化傳代，懸浮細(xì)胞直接分瓶；密度達(dá)80%-90%時需傳代，避免營養(yǎng)枯竭與代謝抑制。

敏感性：對剪切應(yīng)力、污染、溫度變化敏感，需定期更換培養(yǎng)液清除代謝物。

應(yīng)用與局限：便于活細(xì)胞觀察與實驗控制，但體外環(huán)境與體內(nèi)存在差異，長期傳代可能導(dǎo)致遺傳不穩(wěn)定與去分化。