GP2-293Luc(人胚腎上皮包裝細胞)
產(chǎn)品信息:

1. 細胞基本檔案
參數(shù)維度 詳細信息
中文名稱 人胚腎上皮包裝細胞 (帶熒光素酶)
種屬/來源 人源(胚胎腎)
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
主要應用 病毒包裝(逆轉(zhuǎn)錄/慢病毒)、熒光素酶報告基因?qū)嶒灐⑺幬锖Y選
生物安全等級 BSL-2 (因涉及病毒包裝)
產(chǎn)品名稱 | GP2-293Luc(人胚腎上皮包裝細胞) | 英文名稱 | GP2293Luc:GP2-293Luc |
貨號 | AXB9717 | 生長特性 | 貼壁生長 |
2. 詳細培養(yǎng)條件

GP2-293Luc 細胞的培養(yǎng)條件相對標準,推薦使用高糖 DMEM 培養(yǎng)基。
基礎培養(yǎng)基: 推薦使用 DMEM (高糖)。
血清添加: 添加 10% 胎牛血清 (FBS)。
雙抗: 建議添加 1% 青霉素-鏈霉素 (P/S)。
篩選抗生素: 部分實驗為了維持質(zhì)粒穩(wěn)定,可能會添加 G418 (遺傳霉素),具體請參考質(zhì)粒圖譜或說明書。
培養(yǎng)環(huán)境:
溫度:37℃
氣體:5% CO?,95% 空氣
濕度:飽和濕度
詳細操作流程指南

細胞復蘇
快速解凍: 將凍存管從液氮中取出,迅速放入 37℃ 水浴中搖晃,約 1 分鐘內(nèi)融化(留少許冰晶時取出)。
轉(zhuǎn)移離心: 在生物安全柜內(nèi),將細胞懸液轉(zhuǎn)移至含有 5-10mL 預熱完全培養(yǎng)基的離心管中,混勻。
離心洗滌: 1000 RPM(約 150g)離心 5 分鐘,棄去上清液(去除殘留 DMSO)。
接種培養(yǎng): 用新鮮完全培養(yǎng)基重懸細胞,接種至 T25 培養(yǎng)瓶,放入培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
換液: 復蘇后第二天建議換液,去除死細胞。
細胞傳代(貼壁細胞)
時機: 細胞密度達到 80%-90% 匯合度時。
消化液: 建議使用 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液。
操作步驟:

棄去舊培養(yǎng)基,用無鈣鎂 PBS 緩沖液潤洗細胞 1 次。
加入 1-2 mL 消化液,置于 37℃ 培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,鏡下觀察細胞變圓脫落。
加入含血清的完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打混勻。
1000 RPM 離心 5 分鐘,棄上清。
加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸。
傳代比例: 建議 1:2 至 1:5 傳代。
換液頻率: 每 2-3 天 更換一次培養(yǎng)液。
細胞凍存
凍存液配方: 推薦使用 90% FBS + 10% DMSO,或?qū)S玫臒o血清凍存液。
程序: 使用程序降溫盒(或置于 -80℃ 冰箱過夜),隨后轉(zhuǎn)入液氮罐長期保存。
?? 4. 關鍵注意事項

運輸脫落問題: GP2-293Luc 細胞在運輸過程中容易因震蕩而脫落。請勿丟棄漂浮的細胞。處理方法是將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基收集到離心管中,離心(1000 RPM, 5min)收集沉淀,用新鮮培養(yǎng)基重懸后重新接種。
熒光素酶活性: 該細胞系自帶 Luc 標記,通常不需要額外轉(zhuǎn)染即可進行熒光素酶檢測。但若進行病毒包裝實驗,需轉(zhuǎn)染相應的質(zhì)粒。
病毒包裝安全: 由于該細胞用于病毒包裝,屬于 BSL-2 級別,操作時需嚴格遵守生物安全規(guī)范,廢棄物需高壓滅菌處理。
STR 鑒定: 建議在實驗開始前進行 STR 鑒定,以確保細胞系的身份純正,防止交叉污染。
用途限制: 該細胞系僅用于科學研究,不可用于診斷、治療或人體臨床實驗。
公司正在出售的產(chǎn)品:
cANCA(human anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細胞胞漿抗體 | Anti-CD107a/LAMP-1/PE 熒光素PE標記溶酶體相關膜蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg | Anti-HCV-NS3/FITC 熒光素標記病毒-NS3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 環(huán)子孢子蛋白(約氏)抗原 0.5mg | Anti-H2AX/FITC 熒光素標記組蛋白H2AX抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Anti-phospho-c-Raf (Ser259) 0酸化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml | PDX1 英文名稱: 胰島素促進因子抗體(胰十二指腸同源異型盒蛋白) 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgM/FITC FITC標記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格 0.3ml |
Thrombin receptor 英文名稱: 蛋白酶激活受體-1抗體 0.1ml | phospho-ETS1 (Thr38) 英文名稱: 0酸化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗體 0.1ml |
GBP2 英文名稱: G蛋白結合蛋白2抗體 0.2ml | Anti-Phospho-MYL(Ser19) 0酸化肌球蛋白輕鏈2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml |
Anti-HA tag HA tag標簽抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml | Rhesus antibody Rh Penicillin G 青霉素G抗體 規(guī)格 0.1ml |
CPSA ELISA Kit 大鼠復合特異性抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | GP2-293Luc(人胚腎上皮包裝細胞)Anti-DBC1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠缺失基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
LAP(Human Leucine aminopepridase) ELISA Kit 人亮氨酰氨基肽酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | Rhesus antibody Rh Galectin 3 半乳糖凝集素3抗體 規(guī)格 0.1ml |
細胞具體特點如下:

環(huán)境與營養(yǎng):需無菌環(huán)境、精確的溫度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),動物細胞常需血清,植物細胞需激素。
生長方式:貼壁細胞需表面附著,懸浮細胞自由漂浮,半貼壁半懸浮兼具兩者特性。
傳代與密度:貼壁細胞需胰酶消化傳代,懸浮細胞直接分瓶;密度達80%-90%時需傳代,避免營養(yǎng)枯竭與代謝抑制。
敏感性:對剪切應力、污染、溫度變化敏感,需定期更換培養(yǎng)液清除代謝物。
應用與局限:便于活細胞觀察與實驗控制,但體外環(huán)境與體內(nèi)存在差異,長期傳代可能導致遺傳不穩(wěn)定與去分化。
關鍵字: GP2-293Luc;GP2-293Luc(人胚腎上皮包裝細胞;貼壁細胞;
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