人彌漫性大B細胞淋巴瘤;TMD8
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 人彌漫性大B細胞淋巴瘤;TMD8 | 英文名稱 | TMD8 |
規(guī)格 | 1×106 | 細胞形態(tài) | 懸浮生長 |
貨號 | P-X10888 | 細胞生長 | 淋巴母細胞 |
來源:從一名61歲女性雙重打擊淋巴瘤(DHL)患者的外周血中建立,屬于生發(fā)中心B細胞樣(GCB)亞型,EBV陰性。
核心遺傳特征:攜帶MYC基因易位(t(8;14)) 和BCL-2基因易位(t(14;18)),即“雙重打擊”(Double-Hit Lymphoma, DHL),具有高度侵襲性和不良預后特征。
形態(tài)與生長特性:
形態(tài):淋巴母細胞樣,圓形或橢圓形,單個或小簇懸浮生長
生長方式:懸浮生長(無貼壁能力,需離心收集)
倍增時間:約24-36小時(生長速度快,需高頻傳代)
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基 IMDM培養(yǎng)基 + 20%胎牛血清 + 1%雙抗(青霉素/鏈霉素)
培養(yǎng)環(huán)境 37℃、5% CO?、濕度70%-80%
傳代比例 1:3-1:4傳代(細胞密度達1×10? cells/mL時操作,1000rpm離心5分鐘)
凍存液 90% FBS + 10% DMSO(現(xiàn)配)或無血清凍存液
研究應(yīng)用
TMD8因“雙重打擊”特性,主要用于:
雙重打擊淋巴瘤(DHL)的發(fā)病機制研究:MYC與BCL-2協(xié)同驅(qū)動的細胞增殖與凋亡抵抗
靶向藥物聯(lián)合治療實驗:如MYC抑制劑(如OMOMYC)與BCL-2抑制劑(如維奈克拉)的協(xié)同效應(yīng)
耐藥機制探索:模擬臨床中DHL對R-CHOP方案的原發(fā)性耐藥
關(guān)鍵操作注意事項
高頻傳代管理:因倍增時間短,需每日觀察細胞密度,避免過度生長導致培養(yǎng)基酸化(pH值下降)。
IMDM培養(yǎng)基選擇:相較于RPMI-1640,IMDM含更高濃度的氨基酸和維生素,更適合高代謝活性的DHL細胞。
細胞狀態(tài)判斷:健康TMD8細胞折光性強、大小均一;若出現(xiàn)大量碎片或聚團(直徑>50μm),提示狀態(tài)不佳,需及時更換培養(yǎng)基或復蘇新凍存管。
代次:P4,凍存條件為無血清凍存液(FBS:DMSO=9:1)。
產(chǎn)品概述
專為人彌漫性大B細胞(DB細胞)設(shè)計,含1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基、特級胎牛血清及青霉素-鏈霉素,無需額外添加成分。
經(jīng)優(yōu)化測試,可維持細胞最佳生長狀態(tài)。
培養(yǎng)與操作
復蘇:37℃水浴快速解凍,離心后重懸于完全培養(yǎng)基(含10% FBS的RPMI-1640),接種至T25瓶。
傳代:
細胞覆蓋80%時,用0.25% Y蛋白酶消化;
離心后按1:2分瓶,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
凍存:程序降溫(-20℃→-80℃→液氮)或直接-80℃保存。
生長條件
培養(yǎng)基:90% RPMI-1640 + 10% FBS;
環(huán)境:5% CO?、37℃恒溫,懸浮生長。
注意事項
所有操作需在無菌條件下進行,避免污染。
細胞傳代需密切觀察形態(tài),確保消化時間適中(回縮變圓即終止)。
長期保存建議使用液氮,短期可存于-80℃(程序降溫盒優(yōu)化存活率)。
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