商品屬性

產(chǎn)品名稱 | 人骨肉瘤細(xì)胞帶熒光素酶; 143B/LUC (STR) | 英文名稱 | B/LUC |
規(guī)格 | 1×106 | 貨號 | P-X10560 |
種屬來源:人
組織來源:骨
標(biāo)記特性:穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶(Luciferase),適用于活體成像及體外發(fā)光檢測。
細(xì)胞特性

生長特性:貼壁生長
形態(tài):上皮細(xì)胞樣
培養(yǎng)基:90% DMEM + 10%胎牛血清(FBS)+ 1%雙抗(PS)
培養(yǎng)條件:37℃、5% CO?環(huán)境。
藥篩濃度:BSD(Blasticidin)篩選濃度為4.0 μg/mL,傳代后可用2 μg/mL維持抗性。
質(zhì)量控制
STR鑒定:經(jīng)短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)分析驗證,確保細(xì)胞株身份正確。
污染防控:定期檢測支原體污染,建議無菌操作并使用雙抗預(yù)防細(xì)菌污染。
傳代與凍存

傳代方法:按1:2至1:3比例傳代,每周換液2-3次。
凍存液:常規(guī)凍存液(如含10% DMSO的完全培養(yǎng)基),凍存密度建議1×10? cells/mL。
應(yīng)用范圍
研究領(lǐng)域:腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制、藥物篩選、活體成像(熒光素酶報告基因檢測)。
兼容實驗:可與蟾毒靈、順鉑等藥物聯(lián)用研究凋亡效應(yīng)。
細(xì)胞復(fù)蘇
37℃水浴快速解凍凍存管,加入5mL預(yù)溫培養(yǎng)基混勻。
1000 rpm離心5分鐘,棄上清,重懸后接種至T25瓶,次日換液。
細(xì)胞傳代
貼壁細(xì)胞傳代步驟:
PBS洗滌后,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分鐘(37℃)。
顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓脫落時,加入完全培養(yǎng)基終止消化。
離心收集細(xì)胞,按1:2比例分瓶培養(yǎng)(建議傳代密度80%-90%)。
細(xì)胞凍存
消化后離心,用無血清凍存液重懸至1×10^6 cells/mL,分裝至凍存管,程序降溫后轉(zhuǎn)入液氮。
注意事項
復(fù)蘇后建議穩(wěn)定培養(yǎng)2-3代再用于實驗,以確保細(xì)胞狀態(tài)。
長期培養(yǎng)需定期用BSD維持抗性,避免熒光素酶表達(dá)丟失。
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