人臍靜脈內(nèi)皮細胞（永生化）；HUVEC-SV40T+RFP
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 人臍靜脈內(nèi)皮細胞（永生化）；HUVEC-SV40T+RFP | 英文名稱 | HUVEC-SV40T+RFP |
規(guī)格 | 1×106 | 細胞形態(tài) | 貼壁生長 |
貨號 | P-X10780 | 細胞生長 | 內(nèi)皮細胞樣 |
英文名稱：Human Umbilical Vein Endothelial Cells (Immortalized, SV40T+RFP)
簡稱：HUVEC-SV40T+RFP
細胞特性
來源：人臍帶組織，經(jīng)SV40大T抗原基因轉(zhuǎn)導(dǎo)實現(xiàn)永生化，并攜帶紅色熒光蛋白（RFP）標記。
形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣，貼壁生長。
增殖能力：可傳代50-60次，在半固體培養(yǎng)基中形成克隆，無致瘤性（免疫抑制小鼠模型驗證）。
應(yīng)用：內(nèi)皮功能研究、藥物篩選、基因表達分析等。
產(chǎn)品規(guī)格
包裝形式：
凍存管：1 mL/管，細胞數(shù)≥5×10^5 cells/mL。
T25培養(yǎng)瓶：復(fù)蘇后活細胞（常溫運輸）。
質(zhì)檢標準：
無菌檢測：無HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌及真菌污染。
標志物驗證：通過α-SMA和Desmin免疫熒光染色鑒定。
運輸與保存
運輸條件：
凍存管：干冰運輸，接收后立即轉(zhuǎn)入液氮或-80℃保存，或直接復(fù)蘇。
T25瓶：常溫運輸，收到后需37℃靜置2-3小時再處理。
保存建議：長期保存于液氮（-196℃），避免反復(fù)凍融。
細胞復(fù)蘇與培養(yǎng)
復(fù)蘇步驟
解凍：將凍存管迅速置于37℃水浴，至殘留少量冰屑時用75%酒精消毒管壁。
離心：轉(zhuǎn)移內(nèi)容物至15 mL離心管，加入預(yù)溫的RPMI-1640培養(yǎng)基4-5 mL，1500 rpm離心10分鐘。
重懸：棄上清，用完全培養(yǎng)基（如DMEM+10%胎牛血清）重懸細胞，接種至明膠包被的培養(yǎng)瓶。
培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基：推薦DMEM+10%胎牛血清+50 μg/mL卡那霉素（或?qū)Ｓ脙?nèi)皮細胞培養(yǎng)基）。
包被方法：培養(yǎng)瓶用0.5%明膠溶液（去離子水配制）37℃包被2小時或過夜。
傳代比例：1:2至1:3，消化時間約2-3分鐘（0.25%胰酶+EDTA）。
換液頻率：每周2次，細胞匯合度達70-80%時需傳代。
注意事項
復(fù)蘇后首次換液需在24小時內(nèi)完成，以去除殘留凍存保護劑。
永生化細胞需定期檢測SV40T抗原表達穩(wěn)定性。
RFP標記可用于熒光顯微鏡或流式細胞術(shù)追蹤，但長期培養(yǎng)后建議驗證熒光強度。
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關(guān)鍵字： 人臍靜脈內(nèi)皮細胞（永生化）;HUVEC-SV40T+RFP;
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