乳糖含量分光光度法/24樣

產(chǎn)品簡介：
乳糖在β-半乳糖苷酶作用下分解成半乳糖和葡萄糖 ，葡萄糖被特異性酶氧化產(chǎn)生與顯色劑反應的（粉）紅色產(chǎn)物 ，該產(chǎn)物在 510nm 處有最大吸收峰 ，通過校正游離的葡萄糖背景值進而得到乳糖含量。

試劑清單：

所需儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、天平、移液器、研缽、離心機、蒸餾水。

注 意：
正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定

樣品提取（按照步驟依次操作）：

組織樣本：

1、0.1g 組織樣本（水分充足的樣本建議取 0.2g 左右），加 1mL 蒸餾水研磨，粗提液全部轉(zhuǎn)

移到 EP 管中， 12000rpm 離 ，常溫離心 10min ，上清液待測。

液體樣品：

1、近似中性的澄清液體樣本可直接檢測；若為酸性樣本則需先用 NaOH(2M)調(diào) PH 值約 7.4，

然后室溫靜置 30min ，取澄清液體直接檢測。

(可選取幾個樣本 ，進行不同倍數(shù)的稀釋 ，選取適合本次樣本的稀釋倍數(shù) D)

高蛋白含量組織樣本：

1、提取液 A1 的制備：加入 2mL 蒸餾水充分溶解；

2、提取液 A2 的制備：加入 2mL 蒸餾水充分溶解；

3、稱取約 0.1g 樣本（水分充足的樣本建議取 0.2g 左右），加 0.9mL 蒸餾水研磨，粗提液全

部轉(zhuǎn)移到 EP 管中，加入 0.05mL 提取液 A1，混勻后加入 0.05mL 提取液 A2，混勻，用蒸餾水定容到 1mL ，室溫靜置 30min ，若有脂肪除去上層脂肪， 12000rpm 室溫離心10min ，取澄清的液體檢測。

細胞樣本：
1、先收集細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細胞加入 1mL 生理鹽水或磷酸緩沖

液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；12000rpm 4℃離心 10min ，取上清 ，置冰上待測。