產(chǎn)品特點
即開即用：用戶僅需提供樣品DNA模板，無需額外配制反應體系。
高特異性：引物針對小麥GAG56D基因高度保守區(qū)設計，避免與其他微生物DNA交叉反應。
內(nèi)置對照：提供陽性對照，有效區(qū)分假陰性結果。
便捷電泳：PCR Mix含上樣染料，反應后可直接電泳分析。
優(yōu)化性能：預混液經(jīng)嚴格優(yōu)化，確保擴增效率與穩(wěn)定性。
產(chǎn)品名稱 | 小麥內(nèi)標準GAG56D基因染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Wheat Internal Standard GAG56D Gene Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR2716 |
操作流程
1. 樣品準備
DNA提?。喊礃藴史椒ㄌ崛悠稤NA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. PCR反應體系配制（以20μL為例）
| 成分 | 體積（μL） |
| 2× PCR Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| ddH?O | 6 |
3. PCR擴增程序
| 步驟 | 溫度（℃） | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預變性 | 95 | 5 min | 1 |
| 變性 | 95 | 30 sec | 35 |
| 退火 | 55-60* | 30 sec | |
| 延伸 | 72 | 30 sec | |
| 終延伸 | 72 | 5 min | 1 |
*注：退火溫度需根據(jù)引物Tm值優(yōu)化。
4. 結果分析
通過熒光定量PCR儀檢測擴增曲線，或通過瓊脂糖凝膠電泳（1.5%-2%）觀察目的條帶。
實驗參數(shù)設置
基線設定：建議選擇循環(huán)數(shù)6~15，起始點避開信號波動階段，終止點早于最早擴增樣本Ct值1~3個循環(huán)。
擴增程序：
預變性：95℃ 3分鐘
循環(huán)階段（40次）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）
注意事項
實驗分區(qū)：試劑配制、樣品處理及擴增需在不同區(qū)域進行，避免污染。
保存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
適用范圍：僅限科研，不適用于臨床診斷或生產(chǎn)用途。
質(zhì)量控制：建議每次實驗同步運行陽性對照與無模板對照（NTC）。
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關鍵字： 小麥內(nèi)標準GAG56D基因;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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