人腺病毒F40型染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 人腺病毒F40型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Human Adenovirus F40 (HAdV-F40) Dye-Based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR2651 |
檢測原理
本試劑盒采用染料法熒光定量PCR技術(shù)，針對人腺病毒F40型基因組高度保守區(qū)域設(shè)計特異性引物，通過實(shí)時監(jiān)測熒光信號變化，實(shí)現(xiàn)對病毒核酸的定性和定量檢測。檢測靈敏度可達(dá)100拷貝/反應(yīng)，線性范圍覆蓋5個數(shù)量級。
產(chǎn)品組成
預(yù)混液：含DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液及熒光染料。
引物混合液：優(yōu)化設(shè)計的特異性引物。
陽性對照：無傳染性的HAdV-F40 DNA片段（用于標(biāo)準(zhǔn)曲線制備）。
陰性對照：無核酸酶水。
自備試劑與儀器
自備試劑：待測樣品DNA模板（建議純度A260/A280為1.8-2.0）。
適用儀器：
ABI 7500/QuantStudio系列
安捷倫MX3000P/3005P
Roche LightCycler
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf RealPlex4
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
將陽性對照DNA片段梯度稀釋（10^2-10^7拷貝/μL），分裝至標(biāo)記管中。
每管取5μL稀釋液作為模板，與15μL預(yù)混液混合。
2. 樣品檢測
反應(yīng)體系（20μL）：
預(yù)混液10μL
引物混合液2μL
模板DNA 5μL
無核酸酶水補(bǔ)至20μL。
PCR程序：
預(yù)變性：95℃ 3分鐘
循環(huán)階段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）
結(jié)果判讀
定性檢測：Ct值≤35且擴(kuò)增曲線呈S型判為陽性。
定量檢測：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品拷貝數(shù)。
注意事項(xiàng)
操作需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，避免交叉污染。
試劑解凍后需充分混勻，避免反復(fù)凍融。
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 人腺病毒F40型;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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