青枯雷爾氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 青枯雷爾氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Ralstonia solanacearum Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR2671 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度：檢測(cè)限低至100拷貝/反應(yīng)或幾百拷貝/反應(yīng)（欽誠(chéng)生物）。
高特異性：引物針對(duì)青枯雷爾氏菌保守序列設(shè)計(jì)，無(wú)交叉反應(yīng)。
即開(kāi)即用：預(yù)混優(yōu)化引物和反應(yīng)體系，用戶僅需提供DNA模板。
雙重用途：支持定性和定量檢測(cè)，定量線性范圍≥5個(gè)數(shù)量級(jí)。
質(zhì)控保障：含陽(yáng)性對(duì)照（非活體DNA片段），避免假陰性。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀，包括：
ABI系列（如7500、StepOnePlus）
安捷倫（MX3000P/3005P）
Roche LightCycler
Bio-Rad（CFX系列）
Eppendorf Mastercycler
自備試劑
樣本DNA（推薦純度A260/A280=1.8-2.0）。
10×ROX校正染料（部分機(jī)型需添加，參照儀器說(shuō)明書(shū)）。
操作步驟
1. DNA提取
使用兼容的核酸提取試劑盒制備樣本DNA。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（定量檢測(cè)需選做）
按10倍梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照（10^2~10^7拷貝/μL），獨(dú)立操作避免污染。
標(biāo)記離心管（7~2號(hào)），依次加入稀釋液和模板，渦旋混勻。
3. PCR反應(yīng)體系配制
每20μL反應(yīng)體系建議：
2×qPCR預(yù)混液 10μL
引物混合物 0.4μL
DNA模板 2μL
補(bǔ)足無(wú)核酸酶水至20μL。
4. 上機(jī)程序
預(yù)變性：95℃ 3分鐘
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）
結(jié)果分析
定性：Ct值≤35且擴(kuò)增曲線呈S型判為陽(yáng)性。
定量：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算拷貝數(shù)。
注意事項(xiàng)
分區(qū)操作：樣本制備、PCR配制、擴(kuò)增需分區(qū)域進(jìn)行。
避免污染：使用帶濾芯槍頭，陽(yáng)性對(duì)照與樣本分裝隔離。
僅限科研：不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 青枯雷爾氏菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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