油菜源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 油菜源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Canola-Derived Component SYBR qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR2678 |
試劑盒組分
PCR反應預混液：含SYBR Green熒光染料、dNTPs、Mg2?、緩沖液等。
引物混合液：針對油菜源性成分（如PEP基因或其他特異性序列）設計的特異性引物。
陽性質(zhì)控品：950μL×1管（無傳染性DNA片段，濃度1×10?拷貝/μL）。
陰性質(zhì)控品：50μL×1管（無模板對照，用于排除污染）。
說明書：1份（含操作流程、數(shù)據(jù)分析方法等）。
注意：不同批號組分不可混用。
適用儀器與耗材
儀器：支持SYBR Green通道的熒光定量PCR儀。
耗材：無核酸酶的0.2mL PCR管、濾芯吸頭（10/200/1000μL）、離心機等。
樣品要求
樣本類型：食品、植物組織、加工品等需檢測油菜源性成分的樣本。
樣本處理：
提取DNA時避免交叉污染，建議使用商品化核酸提取試劑盒。
短期保存于-20℃，長期保存需-70℃（不超過6個月）。
運輸：2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。
操作方法
標準曲線制備（定量檢測需選做）：
將陽性質(zhì)控品梯度稀釋（102~10?拷貝/μL），每個濃度設3復孔。
PCR反應體系（20μL）：
預混液10μL + 引物2μL + 模板DNA 2μL + ddH?O補至20μL。
擴增程序：
預變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循環(huán)，采集熒光信號）；
熔解曲線分析：60~95℃（驗證擴增特異性）。
結果判讀
定性檢測：Ct值≤35且熔解曲線為單一峰，判為陽性。
定量檢測：根據(jù)標準曲線計算模板濃度（線性范圍102~10?拷貝/μL）。
注意事項
實驗需在獨立潔凈區(qū)域進行，避免氣溶膠污染。
陽性質(zhì)控品僅用于驗證實驗有效性，不可直接作為樣本檢測。
若需定制其他基因（如抗藥性基因、轉基因元件），可聯(lián)系提供特異性引物設計服務。
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關鍵字： 油菜源性成分;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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