大豆擬莖點(diǎn)種腐病菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 大豆擬莖點(diǎn)種腐病菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Phomopsis longicolla Dye-Based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR2686 |
技術(shù)原理
本試劑盒基于染料法熒光定量PCR技術(shù)，通過SYBR Green等熒光染料與雙鏈DNA結(jié)合的特性，實時監(jiān)測PCR擴(kuò)增過程中熒光信號的累積。通過分析擴(kuò)增曲線和Ct值（閾值循環(huán)數(shù)），實現(xiàn)對目標(biāo)病原菌DNA的定性和定量檢測。
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開即用：預(yù)混優(yōu)化反應(yīng)體系，用戶僅需提供模板DNA即可進(jìn)行實驗。
高靈敏度：引物經(jīng)特異性優(yōu)化，可檢測低至10拷貝/μL的病原菌DNA。
快速高效：全程耗時約1.5小時，顯著快于傳統(tǒng)培養(yǎng)或形態(tài)學(xué)鑒定方法。
穩(wěn)定性強(qiáng)：批內(nèi)與批間重復(fù)性誤差≤5%，適用于高通量檢測需求。
操作流程
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從大豆種子/植株組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補(bǔ)充無核酸酶水至終體積。
PCR擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗證擴(kuò)增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴(kuò)增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測或結(jié)合熔解曲線分析。
注意事項
避免反復(fù)凍融試劑，分裝后使用。
實驗需在無菌環(huán)境下操作，防止交叉污染。
陽性對照建議與待測樣本同步檢測，以排除假陰性。
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關(guān)鍵字： 大豆擬莖點(diǎn)種腐病菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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