黑麥草腥黑粉菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 黑麥草腥黑粉菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Tilletia secalis Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR2687 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒專用于檢測黑麥草腥黑粉菌（Tilleiia walkeri Castl.）的DNA，采用染料法熒光定量PCR技術(shù)，適用于科研領(lǐng)域的定性及定量分析。試劑盒包含優(yōu)化的引物、熒光染料、反應(yīng)緩沖液及陽性對照，確保高靈敏度和特異性。
產(chǎn)品特點
即開即用：用戶僅需提供純化的DNA模板。
高靈敏度：引物及染料針對目標(biāo)基因保守區(qū)域設(shè)計，檢測限低至單拷貝級別。
特異性強：引物通過生物信息學(xué)驗證，避免與其他微生物DNA交叉反應(yīng)。
雙重功能：支持絕對定量（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）和相對定量，線性范圍覆蓋5個數(shù)量級。
質(zhì)控完善：含陽性對照，有效排除假陰性干擾。
兼容性廣：適配多數(shù)商業(yè)核酸提取試劑盒。
規(guī)格與儲存
規(guī)格：50次反應(yīng)（20μL體系/次）。
儲存條件：-20℃避光保存，有效期12個月；避免反復(fù)凍融。
實驗流程
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（獨立操作區(qū)）
標(biāo)記6管為梯度稀釋點（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋，混勻后作為標(biāo)準(zhǔn)品（避免污染）。
3. PCR反應(yīng)體系配制（試劑配制區(qū)）
按以下比例配制（示例）：
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機檢測
程序設(shè)置：預(yù)變性95℃ 3 min；40循環(huán)（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)Ct值及標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度。
注意事項
分區(qū)操作：嚴(yán)格區(qū)分樣本制備、試劑配制及擴增區(qū)，避免氣溶膠污染。
陰性對照：每批次需包含無模板對照（NTC）。
結(jié)果判讀：熔解曲線應(yīng)為單一峰，否則需排查非特異擴增。
應(yīng)用范圍
僅限科研用途，不適用于臨床診斷。
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