檢驗(yàn)原理
本試劑盒基于SYBR Green I染料法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，針對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌高度保守基因區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物。在擴(kuò)增過程中，SYBR Green染料與雙鏈DNA結(jié)合釋放熒光信號(hào)，通過實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度實(shí)現(xiàn)核酸的定性與定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 革蘭氏陰性細(xì)菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Gram-negative Bacteria Universal Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR3113 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
高特異性：引物經(jīng)優(yōu)化設(shè)計(jì)，可特異性檢測(cè)革蘭氏陰性細(xì)菌，避免交叉反應(yīng)。
高靈敏度：檢測(cè)限可達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)。
便捷性：預(yù)混式試劑（含DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等），用戶僅需提供模板DNA。
質(zhì)控保障：含陽性對(duì)照（革蘭氏陰性細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)品），便于排除假陰性。
適用范圍：科研用途（不可用于臨床診斷）。
操作步驟
樣本處理：提取待測(cè)樣本DNA（推薦濃度≥10 ng/μL）。
反應(yīng)體系配制：按說明書比例混合預(yù)混液、引物、模板DNA及ROX參比染料（需根據(jù)機(jī)型選擇）。
PCR程序設(shè)置：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
擴(kuò)增循環(huán)（40次）：95℃ 10秒→60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）；
熔解曲線分析：60℃~95℃，梯度升溫。
數(shù)據(jù)分析：通過閾值循環(huán)數(shù)（Ct值）及熔解曲線判定結(jié)果。
注意事項(xiàng)
避免反復(fù)凍融試劑，開封后建議分裝保存。
操作需在無核酸污染環(huán)境下進(jìn)行，建議使用UDG酶防污染體系。
熔解曲線出現(xiàn)非單一峰時(shí)需排除引物二聚體或污染干擾。
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關(guān)鍵字： 革蘭氏陰性細(xì)菌通用;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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